Détermination des structures 3D des macromolécules biologiques par diffraction X. Partie 1

L'obtention de cristaux de qualité nécessite de disposer le plus souvent de plusieurs milligrammes de la macromolécule d'intérêt à l'état soluble et avec une très grande pureté. Les premières structures tridimensionnelles de macromolécules correspondaient à des molécules qui pouvaient facilement être obtenues en grande quantité et qui cristallisaient relativement facilement. Aujourd'hui, on aborde une étude cristallographique d'une macromolécule pour résoudre un problème biologique donné. La macromolécule cible peut être disponible en faible quantité, voire pratiquement insoluble. Néanmoins, la croissance importante du nombre de structures tridimensionnelles résolues vient de l'utilisation des techniques de la biologie moléculaire. Dès que le gène correspondant à la protéine étudiée a pu être identifié, il peut être cloné dans un vecteur d'expression et exprimé dans une cellule hôte procaryotique ou eucaryotique.

Les systèmes de surexpression les plus utilisés pour les études structurales sont la bactérie Escherichia coli, les cellules d'insectes associées à un vecteur baculovirus, des cellules de mammifères et la levure. Le système bactérien...