2. Techniques d’analyse des acides nucléiques : les outils de base
Les acides nucléiques sont des macromolécules polyanioniques chargées pouvant migrer dans un champ électrique. L’électrophorèse permet de séparer les fragments d’ADN ou les molécules d’ARN en fonction de leur poids moléculaire, donc du nombre de bases ou de paires de bases, avec des degrés de résolution variables en fonction de la nature et de la densité de réticulation du gel utilisé. Deux types de gels existent : les gels d’agarose et les gels de polyacrylamide. En fonction de la taille du produit à examiner, la concentration d’agarose ou d’acrylamide à utiliser sera différente (tableau 1).
Le gel de polyacrylamide est utilisé pour la séparation des petits fragments d’ADN de une à plusieurs centaines de paires de bases (pb). Ses applications majeures sont la séparation des petits fragments d’ADN, le séquençage (gels dénaturants) et la purification d’oligonucléotides de synthèse....
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