Oligosaccharides et polysaccharides
Électrophorèse capillaire - Applications

4.1 Oligosaccharides

L’ECZ et l’ECG sont les deux modes principalement utilisés pour analyser les oligosaccharides libérés des protéines.

• La séparation en mode ECZ des oligosaccharides de type oligomannose possédant des groupements ionisables faibles (sucres neutres) est généralement effectuée en utilisant un tampon borate. Le principe de la séparation repose sur la complexation des sucres avec le borate pour former des complexes chargés négativement. La séparation peut être également menée en l’absence d’agents complexants en utilisant des conditions de pH extrêmement basiques permettant la déprotonation des sucres. L’analyse par ECZ des oligosaccharides comportant des groupements acides comme, par exemple, les acides sialiques, peut en revanche être menée en utilisant une gamme de pH beaucoup plus large.

  En raison du faible coefficient d’absorptivité molaire des carbohydrates, la détection par spectrométrie UV indirecte, réalisée en ajoutant au tampon d’analyse un additif possédant un groupement chromophore tels que le tryptophane, l’acide 1-naphtylacétique ou l’acide sorbique, est souvent préférée à la détection directe. La dérivation des oligosaccharides par un agent chromophore ou fluorophore, dont la liste est présentée dans l’article Électrophorèse capillaire- Appareillage concernant les modes de détection, est une alternative souvent retenue car, dans le cas des sucres neutres, outre le gain en sensibilité, le choix judicieux de l’agent de dérivation peut permettre d’introduire une charge sur le dérivé. Cette stratégie est fréquemment retenue pour établir par ECZ le profil en oligosaccharides d’une glycoprotéine :...