Tests de détection biologique très sensibles à base de nouveaux traceurs fluorescents

Les résultats obtenus avec les immunoliposomes dans le cadre des tests « bandelette » nous ont poussé à évaluer ce procédé dans d'autres techniques permettant la détection de molécules sur phase solide. Dans ce cadre, nous nous sommes intéressés à la technique d'immunoempreinte (western blot).

3.1 Immunoempreintes et leurs limitations

L'immunoempreinte est l'une des méthodes les plus utilisées pour analyser et détecter des protéines présentes dans un milieu complexe. Elle consiste dans un premier temps à séparer les différents composants d'un échantillon par électrophorèse sur gel puis à transférer ceux-ci sur une phase solide (membrane de nitrocellulose, de nylon ou de polyfluorure de vinylidène : PVDF). Les protéines d'intérêt sont identifiées en utilisant des anticorps spécifiques dont la présence est révélée par la production d'un signal. Les marqueurs permettant l'obtention du signal sont soit directement couplés à l'anticorps spécifique (anticorps primaire), soit couplés à une molécule qui se fixe sur les anticorps spécifiques (immunoglobulines anti-anticorps...