Immobilisation des éléments sensibles des biocapteurs
Nez électroniques de dernière génération : les nanobiosenseurs

Une étape clef de l'élaboration d'un biosenseur est l'immobilisation des éléments sensibles du capteur sur un support solide. Idéalement, le procédé d'immobilisation doit conduire à lier fortement ces éléments sur la surface, à optimiser la densité du dépôt, à orienter uniformément et convenablement les récepteurs de façon à garantir leur accessibilité pour les ligands, et enfin il doit minimiser les interactions non spécifiques des espèces odorantes avec les sous-couches de fonctionnalisation du support.

Étant des récepteurs transmembranaires, les récepteurs olfactifs ne conservent leur activité fonctionnelle que s'ils sont maintenus dans un environnement hydrophobe comme la bicouche lipidique. Pour cette raison, ainsi que du fait de leur faible niveau d'expression en système recombinant hétérologue, il serait très délicat, voire impossible, de purifier et de reconstituer un récepteur olfactif dans des membranes artificielles, et chaque récepteur serait susceptible de nécessiter une procédure spécifiquement adaptée.

Afin de contourner ces difficultés, nous avons proposé une procédure consistant à préparer des nanosomes d'environ 50 nm de diamètre à partir de la fraction membranaire de cellules de levure modifiées génétiquement pour exprimer un récepteur donné . Ainsi, les récepteurs ne quittent jamais la bicouche lipidique dans laquelle ils s'insèrent lors de leur expression, et conservent leur activité intégrale. La figure 3 montre différentes images obtenues en microscopie électronique après la préparation des nanosomes.

Les nanosomes sont donc bien adaptés pour l'élaboration de biocapteurs. Grâce à leur taille, ils peuvent servir d'éléments sensibles pour l'élaboration de biocapteurs miniaturisés, de l'échelle micrométrique à l'échelle nanométrique. Enfin, la réponse fonctionnelle d'un récepteur porté par des nanosomes donne accès à sa seule pharmacologie, sans contribution de la cascade de...