4. Détermination des constituants mineurs
La fraction insaponifiable ne représente généralement que 0,5 à 2 % des corps gras. Alors que la fraction saponifiable ne contient que des triglycérides, la fraction insaponifiable est composée de différents groupes, chaque groupe ayant un nombre plus ou moins important de constituants.
La première étape de toute analyse sera le fractionnement de l’insaponifiable, afin de pouvoir isoler chaque famille.
4.1 Fractionnement de l’insaponifiable
Après saponification du corps gras, la fraction insaponifiable peut être extraite (à l’aide d’hexane ou d’oxyde diéthylique) puis pesée après séchage.
Le fractionnement s’effectue généralement par CCM sur plaque de silice, de nombreux systèmes éluants pouvant être utilisés : chloroforme-oxyde diéthylique 80-20 v/v, hexane-oxyde diéthylique 70-30 v/v, hexane-acétate d’éthyle 80-20 v/v. L’élution est réalisée par polarité décroissante, Rf hydrocarbures : 0,97, Rf stérols 0,25. La révélation est effectuée par pulvérisation de dichloro-2,7-difluorescéine ou de rhodamine B.
L’échantillon...
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