Bibliographie & annexes
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RÉSUMÉ
La chromatographie planaire se distingue nettement de la chromatographie classique, et plusieurs types de détection sont possibles : en discontinu, en continu. Les méthodes d'analyse qui en découlent sont soit qualitatives (détection visuelle) soit quantitatives (densitométrie). Dans cette dernière configuration, la plaque chromatographique peut être alors considérée comme une colonne plate à usage unique. Après grattage de la zone où la substance a été localisée, la phase stationnaire est séparée du soluté et soumis à une technique de spectrométrie (infrarouge, de masse...).
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Planar chromatography is very different from traditional chromatography and several types of detection are possible: discontinuous and continuous. The analysis methods are either quantitative (visual detection) or quantitative (densitometry). In the second case, the chromatographic plate can be considered as a flat column for a single use. After scraping the area where the substance has been localized, the stationary phase is separated from the solute and subjected to a spectrometric technique (infrared, mass, etc.).
Auteur(s)
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Antoine Michel SIOUFFI : Docteur ès sciences - Professeur émérite à l’Université Paul Cézanne, Aix Marseille III
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Chantal DAUPHIN : Docteur ès sciences pharmaceutiques - Maître de conférences à l’université Paris XI
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Dominique PRADEAU : Docteur ès sciences pharmaceutiques - Pharmacien responsable de l’Établissement pharmaceutique des Hôpitaux de Paris
INTRODUCTION
En chromatographie planaire classique, la détection des substances est une opération distincte de la chromatographie et elle s’effectue sur une couche débarrassée du solvant de développement : c’est une détection en discontinu. En chromatographie planaire à flux forcé, on peut procéder de la même façon, mais il est également possible de réaliser une détection en continu au moyen d’un détecteur semblable à ceux utilisés en CLHP. En détection en discontinu, la méthode générale consiste à comparer les régions de la couche où il n’y a pas d’échantillon aux régions dans lesquelles l’échantillon est présent. Lorsque suffisamment de substance peut être récupérée pour procéder à une identification par une méthode spectrale, la plaque est grattée à l’endroit où la substance a été localisée, la phase stationnaire est séparée du soluté et il ne reste plus qu’à réaliser la spectrométrie (infrarouge, de masse, etc.). Nous allons comparer qualitativement et quantitativement les différentes méthodes d’analyse.
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Détection visuelle5. Conclusion
De nos jours de nombreuses étapes restent à franchir, mais les grands axes sont d’ores et déjà ébauchés.
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Dépôt : l’automatisation totale de cette étape, incluant une éventuelle préparation de l’échantillon (pesée, extraction...) est en voie d’être achevée.
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Phases adsorbantes : de nombreux efforts concernant la compatibilité avec les phases éluantes, la structure du milieu poreux, la présence d’additifs dans la couche adsorbante sont encore à faire. Il ne fait pas de doute que de nouvelles technologies vont permettre l’apparition sur le marché de générations originales de plaques : des couches plus fines en sont une des approches les plus réalistes.
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Développement : l’analyse multicouche (multi-layer) en flux forcé offre les perspectives de développement les plus intéressantes.
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Formation de dérivés : l’ère de la révélation à visée qualitative (spray) commence à laisser le pas à de nouveaux procédés de dérivation offrant des caractéristiques se prêtant à l’analyse quantitative et permettant l’utilisation de nouveaux réactifs.
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Détection : la compatibilité à de nombreuses méthodes de couplage, les procédés originaux comme l’analyse d’images sont autant d’atouts supplémentaires pour l’analyste, qui s’ajoutent aux avantages considérables de la CP. L’analyste dispose du chromatogramme sur la plaque et il peut utiliser de multiples procédés de détection. En particulier, il peut retraiter les solutés, c’est-à-dire changer de méthode de détection (UV → fluorescence par exemple). Il s’agit là (avec la possibilité d’analyse simultanée de plusieurs échantillons) de l’atout majeur de la CP, car aucune autre technique chromatographique ne le permet.
Ainsi, bien plus qu’une méthode concurrente des autres techniques chromatographiques, la chromatographie planaire doit être considérée comme une méthode à part entière, complémentaire aux autres. De l’avantage d’une méthode en discontinu (off-line) offrant un grand nombre d’alternatives, elle évolue également vers une procédure...
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Conclusion
BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - STAHL (E.) - Dünnschicht-Chromatographie. Ein Laboratoriumshandbuch - . Springer-Verlag, Berlin (1962).
-
(2) - RANDERATH (K.) - Chromatographie sur couches minces - . Gauthier-Villars, Paris (1971).
-
(3) - GUIOCHON (G.), GONNORD (M.F.), ZAKARIA (M.), BEAVER (L.), SIOUFFI (A.M.) - Chromatography with a two dimensional column - . Chromatographia, 17, 121-126 (1983).
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(4) - RIGHEZZA (M.), SIOUFFI (A.M.) - Planar chromatography with rectangular packed capillary columns and electrochemical detection - . J. Planar Chromatogr., 1, 293-298 (1988).
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(5) - RUOFF (A.L.), GIDDINGS (J.C.), STEWART (G.H.), SHIN (H.K.) - Diffusion of liquids in unsatured paper - . J. Planar Chromatogr., 3, 438-445 (1960).
-
(6) - GUIOCHON (G.), SIOUFFI (A.M.) - Study of the performances of thin layer chromatography. III. Flow velocity of the mobile phase - ....
(liste non exhaustive)
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Macherey Nagel http://www.macherey-nagel.com
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HAUT DE PAGE1.2 Appareillages de chromatographie planaire
Camag http://www.camag.ch
Desaga http://www.desaga.de
Radiomatic http://las.perkinelmer.com
Shimadzu http://www.shimadzu.fr
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