Présentation
Auteur(s)
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Marcel CAUDE : Ingénieur du Conservatoire National des Arts et Métiers (CNAM) - Docteur ès Sciences - Directeur de Recherche au Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
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Alain JARDY : Ingénieur CNAM - Docteur ès Sciences - Maître de Conférences à l’École Supérieure de Physique et Chimie de Paris
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Lire l’articleINTRODUCTION
La chromatographie en phase liquide sur colonnes est devenue un outil analytique performant utilisé dans des domaines variés. Ce développement est dû à la fois à une meilleure compréhension des mécanismes d’interaction − au demeurant de plus en plus diversifiés −, aux grandes efficacités obtenues avec des phases stationnaires de plus en plus fines (3 µm) et enfin aux progrès importants effectués dans le domaine de l’appareillage, en particulier pour la détection.
La chromatographie en phase liquide couvre un vaste domaine d’applications que l’on peut scinder en quatre grands thèmes : pétrochimie, environnement, pharmacie et fluides biologiques, produits alimentaires et agroalimentaires (les séparations d’isomères optiques, l’analyse de composés inorganiques et de polymères font l’objet d’autres articles de ce traité).
Nous nous contenterons, devant l’abondance de la littérature, de donner pour chaque thème des références d’ouvrages et articles récents de synthèse et, à titre d’exemple, nous développerons deux applications caractéristiques.
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"Techniques d'analyse"
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1. Appareillage
Le principe d’un chromatographe en phase liquide est représenté sur la figure 1. Les éléments en trait plein permettent d’opérer en régime isocratique (c’est-à-dire à composition de phase éluante constante) ; on peut y adjoindre les éléments en tireté pour permettre la mise en œuvre de l’élution graduée, de l’automatisation des analyses, de l’analyse quantitative et du fractionnement de l’effluent (chromatographie semi-préparative).
En général, l’ensemble de ces éléments est piloté à l’aide de microprocesseurs.
1.1 Contraintes technologiques
La mise en œuvre de phases stationnaires de granulométrie de plus en plus fine ayant considérablement amélioré l’efficacité des colonnes implique de limiter la dispersion des bandes des solutés à l’extérieur de la colonne chromatographique. Les contraintes portent aussi bien sur l’injection, les connexions et raccords que sur la détection. En effet, le nombre de plateaux mesuré N sur un chromatogramme est donné par la relation :
avec :
- VR :
- volume de rétention du pic considéré
- σt :
- écart-type volumique total,
-
: - = variance totale
-
: - = variance due à la colonne
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