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Procédés de culture en masse de cellules animalesArticle de référence | Réf : BIO6810 v1
Auteur(s) : Hassan CHAABIHI
Date de publication : 10 mai 2015
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ITR ; ITRs
Les ITR, pour Inverted Terminal Repeats, sont des séquences répétées et inversées qui se trouvent aux extrémités de certains génomes viraux. Dans le cas des AAV, ces séquences forment des structures en épingle à cheveux à chacune des extrémités de l'ADN viral monocaténaire. Elles sont impliquées dans la réplication du génome, dans son intégration au chromosome 19 des cellules hôtes, mais également dans l'encapsidation virale.
Mode perfusé en culture cellulaire ; perfused mode in cell culture
Mode qui consiste à soutirer du milieu de culture contenant des produits métabolisés et à le remplacer par du milieu neuf. Les cellules sont maintenues en place et le volume de la culture reste généralement le même durant le processus.
N-glycosylation ; N-glycosylation
Série de réactions mettant en jeu un grand nombre d'enzymes cellulaires qui permet de fixer une chaîne glucidique plus ou moins complexe sur des asparagines (asn) dans une séquence consensus du type asn-X-sérine/thréonine (X pouvant être n'importe quel acide aminé sauf la proline). Le processus de N-glycosylation débute dans le réticulum endoplasmique et se poursuit dans l'appareil de Golgi. Il ne concerne par conséquent que les protéines qui transitent par ces compartiments (protéines membranaires et sécrétées notamment) ou qui y sont naturellement localisées.
Nombre de passages ; passage number
La culture de cellules in vitro implique un entretien régulier afin de maintenir des conditions de croissance optimales. Arrivées à une certaine densité, les cultures doivent être diluées et transférées dans de nouveaux flacons en apportant du milieu neuf (repiquage). Le nombre de passages d'une lignée cellulaire correspond au nombre de repiquages subis depuis l'origine de la lignée.
Recombinaison homologue ; homologous recombination
Processus biologique complexe par lequel des enzymes provoquent des cassures suivies de ligations au niveau de deux séquences d'acides nucléiques identiques, aboutissant à un échange de matériel génétique.
Titrage viral ; viral titration
Le titrage consiste à infecter des cellules par des dilutions limites de virus pour calculer le nombre d'unités infectieuses par unité de volume de la suspension virale. Ces infections sont réalisées soit dans...
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(1) - ABE (T.), MATSUURA (Y.) - Host innate immune responses induced by baculovirus in mammals. - Curr. Gene. Ther., 10, p. 226-231 (2010).
(2) - AIRENNE (K.J.), HU (Y.C.), KOST (T.A.), SMITH (R.H.), KOTIN (R.M.), ONO (C.), MATSUURA (Y.), WANG (S.), YLÄ-HERTTUALA (S.) - Baculovirus : an insect-derived vector for diverse gene transfer applications. - Mol. Ther., 21, p. 739-749 (2013).
(3) - AIRENNE (K.J.), MAKKONEN (K.E.), MÄHÖNEN (A.J.), YLÄ-HERTTUALA (S.) - In vivo application and tracking of baculovirus. - Curr. Gene. Ther., 10, p. 187-194 (2010).
(4) - ALNEMRI (E.S.), ROBERTSON (N.M.), FERNANDES (T.F.), CROCE (C.M.), LITWACK (G.) - Overexpressed full-length human BCL2 extends the survival of baculovirus-infected Sf9 insect cells. - Proc. Natl. Acad. Sci., États-unis, 89, p. 7295-7299 (1992).
(5) - AUMILLER (J.J.), HOLLISTER (J.R.), JARVIS (D.L.) - A transgenic lepidopteran insect cell line engineered to produce CMP-sialic acid and sialoglycoproteins. - Glycobiology, 13, p. 497-507 (2003).
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