Présentation
Auteur(s)
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Myriam TAVERNA : Maître de conférences en chimie analytique Laboratoire de chimie analytique Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry)
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Isabelle LE POTIER : Maître de conférences en chimie analytique Laboratoire de chimie analytique Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry)
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Philippe MORIN : Professeur de chimie analytique - Institut de chimie organique et analytique - Université d’Orléans
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Lire l’articleINTRODUCTION
L’électrophorèse capillaire est une technique très performante combinant la plupart des avantages de l’électrophorèse traditionnelle et de la chromatographie liquide haute performance : large champ d’application, efficacité très importante, grande rapidité et souplesse incontestable de mise en œuvre. La plupart des appareils commercialisés bénéficie d’une complète automatisation permettant à la fois l’injection de l’échantillon, la séparation des analytes ainsi que leur détection. C’est une technique compatible avec de nombreux modes de détection, dont les plus courants sont la spectrophotométrie d’absorption UV-visible, la fluorimétrie et la spectrométrie de masse.
Ceci est le deuxième volet de l’étude sur l’électrophorèse capillaire qui comprend :
Électrophorèse capillaire- Principe : Électrophorèse capillaire. Principe ;
[P 3 366] : Électrophorèse capillaire. Appareillage ;
Électrophorèse capillaire- Applications : Électrophorèse capillaire. Applications.
Pour un exposé sur la théorie générale de l’électrophorèse capillaire, le lecteur pourra consulter l’article Électrophorèse, référence , dans ce traité.
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VERSIONS
- Version courante de oct. 2013 par Agnès HAGÈGE, Thi Ngoc Suong HUYNH
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Capillaires de séparationArticle inclus dans l'offre
"Techniques d'analyse"
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1. Structure générale
L’électrophorèse capillaire est une méthode d’analyse désormais reconnue en raison de ses qualités intrinsèques (efficacité de pic comprise généralement entre 100 et 400 000 plateaux théoriques, résolution élevée, simplicité de la composition du tampon électrophorétique, conditionnement aisé du capillaire, rapidité et automatisation des séparations, faible consommation d’échantillons et de tampons en général dénués de solvants organiques, utilisation possible de nombreux détecteurs-spectrométrie d’absorbance UV, fluorimétrie, conductométrie et couplage avec la spectrométrie de masse). Elle est d’autre part complémentaire des autres techniques séparatives (en particulier chromatographiques), ce qui permet de valider des méthodes de façon croisée.
Un appareil d’électrophorèse capillaire comprend le capillaire de séparation, les deux électrodes, le générateur haute tension, les systèmes d’injection et de détection (figure 1). Le capillaire de séparation a une longueur importante (20 à 100 cm) et un diamètre faible (50 ou 75 µm). Les deux extrémités du capillaire sont plongées dans des récipients contenant des tampons ioniques. L’anode et la cathode sont en platine et reliées à une alimentation haute tension permettant de délivrer des tensions positives ou négatives allant jusqu’à 30 kV. Selon les séparations, l’injection a lieu du côté anodique ou du côté cathodique. La détection s’effectue au travers du capillaire et à quelques centimètres de l’extrémité terminale du capillaire pour les détections les plus courantes (spectrométrie d’absorbance UV-visible et fluorimétrie) ou à l’extrémité du capillaire lors du couplage avec la spectrométrie de masse. L’acquisition et le traitement des données du détecteur (réponse en fonction du temps de migration) se fait de manière similaire à la chromatographie en phase liquide. Le signal du détecteur enregistré en fonction du temps s’appelle un électrophérogramme. Les appareils sont en général équipés de systèmes de thermorégulation pour permettre de contrôler la température et dissiper la chaleur produite par effet Joule.
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - COUDERC (F.), CAUSSE (E.), BAYLE (C.) - Drug analysis by capillary electrophoresis and laser induced fluorescence - . Electrophoresis 19, p. 2777-2790 (1998).
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(2) - CAHOURS (X.), DESSANS (H.), MORIN (P.), DREUX (M.), AGROFOGLIO (L.) - Determination at ppb level of an anti-human immunodeficiency virus nucleoside drug by capillary electrophoresis-electrospray ionization tandem mass spectrometry - . J. Chromatogr. A 895, p. 101-109 (2000).
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(3) - BREADMORE (M.C.) , HADDAD (P.R.) - Approches to enhancing the sensitivity of capillary electrophoresis methods for the determination of inorganic and small organic anions. - Electrophoresis 22 (12) p. 2464- 2489 (2001).
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(4) - GAREIL (P.), PELTRE (G.) - Électrophorèse - . Électrophorèse
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(5) - MONÉGIER (B.) - Électrospray - . Électrospray (1997).
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