Structure générale
Électrophorèse capillaire - Appareillage

L’électrophorèse capillaire est une méthode d’analyse désormais reconnue en raison de ses qualités intrinsèques (efficacité de pic comprise généralement entre 100 et 400 000 plateaux théoriques, résolution élevée, simplicité de la composition du tampon électrophorétique, conditionnement aisé du capillaire, rapidité et automatisation des séparations, faible consommation d’échantillons et de tampons en général dénués de solvants organiques, utilisation possible de nombreux détecteurs-spectrométrie d’absorbance UV, fluorimétrie, conductométrie et couplage avec la spectrométrie de masse). Elle est d’autre part complémentaire des autres techniques séparatives (en particulier chromatographiques), ce qui permet de valider des méthodes de façon croisée.

Un appareil d’électrophorèse capillaire comprend le capillaire de séparation, les deux électrodes, le générateur haute tension, les systèmes d’injection et de détection (figure 1). Le capillaire de séparation a une longueur importante (20 à 100 cm) et un diamètre faible (50 ou 75 µm). Les deux extrémités du capillaire sont plongées dans des récipients contenant des tampons ioniques. L’anode et la cathode sont en platine et reliées à une alimentation haute tension permettant de délivrer des tensions positives ou négatives allant jusqu’à 30 kV. Selon les séparations, l’injection a lieu du côté anodique ou du côté cathodique. La détection s’effectue au travers du capillaire et à quelques centimètres de l’extrémité terminale du capillaire pour les détections les plus courantes (spectrométrie d’absorbance UV-visible et fluorimétrie) ou à l’extrémité du capillaire lors du couplage avec la spectrométrie de masse. L’acquisition et le traitement des données du détecteur (réponse en fonction du temps de migration) se fait de manière similaire à la chromatographie en phase liquide. Le signal du détecteur enregistré en fonction du temps s’appelle un électrophérogramme. Les appareils sont en général équipés de systèmes de thermorégulation pour permettre de contrôler la température et dissiper la chaleur produite par effet Joule.