Présentation
Auteur(s)
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Myriam TAVERNA : Maître de conférences en chimie analytique Laboratoire de chimie analytique Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry)
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Isabelle LE POTIER : Maître de conférences en chimie analytique Laboratoire de chimie analytique Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry)
-
Philippe MORIN : Professeur de chimie analytique - Institut de chimie organique et analytique - Université d’Orléans
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Lire l’articleINTRODUCTION
L’électrophorèse capillaire est une technique très performante combinant la plupart des avantages de l’électrophorèse traditionnelle et de la chromatographie liquide haute performance : large champ d’application, efficacité très importante, grande rapidité et souplesse incontestable de mise en œuvre. La plupart des appareils commercialisés bénéficie d’une complète automatisation permettant à la fois l’injection de l’échantillon, la séparation des analytes ainsi que leur détection. C’est une technique compatible avec de nombreux modes de détection, dont les plus courants sont la spectrophotométrie d’absorption UV-visible, la fluorimétrie et la spectrométrie de masse.
Ceci est le deuxième volet de l’étude sur l’électrophorèse capillaire qui comprend :
Électrophorèse capillaire- Principe : Électrophorèse capillaire. Principe ;
[P 3 366] : Électrophorèse capillaire. Appareillage ;
Électrophorèse capillaire- Applications : Électrophorèse capillaire. Applications.
Pour un exposé sur la théorie générale de l’électrophorèse capillaire, le lecteur pourra consulter l’article Électrophorèse, référence , dans ce traité.
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- Version courante de oct. 2013 par Agnès HAGÈGE, Thi Ngoc Suong HUYNH
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3. Modes d’injection
En raison des dimensions mêmes du capillaire et des faibles volumes injectés (quelques nanolitres), il n’est pas possible d’employer les méthodes classiquement utilisées en chromatographie pour l’injection des échantillons. Sur la majorité des appareils commerciaux, deux modes d’introduction de l’échantillon dans le capillaire sont proposés : l’injection hydrodynamique et l’injection électrocinétique. L’extrémité d’entrée du capillaire est plongée dans le flacon contenant l’échantillon durant l’injection.
3.1 Injection hydrodynamique
Ce mode d’injection consiste à créer, pendant une durée de quelques secondes, une différence de pression entre les deux extrémités du capillaire, soit en créant une surpression au niveau du flacon de l’échantillon, qui le propulse alors à l’intérieur du capillaire, soit en générant une dépression au niveau de l’extrémité terminale du capillaire provoquant une aspiration de l’échantillon présent à l’autre extrémité (figure 2). Le volume d’échantillon injecté dépend de plusieurs paramètres (différence de pression appliquée, temps d’injection, viscosité de l’échantillon, longueur et diamètre du capillaire).
Ce volume peut être calculé grâce à l’équation de Poiseuille :
avec :
- Δp0 :
- différence de pression (dyne/cm2)
- φ :
- diamètre du capillaire (cm)
- t0 :
- temps d’injection de l’échantillon (s)
- η :
- viscosité de l’échantillon (poise)
- LT :
- longueur totale du capillaire (cm)
- V0 :
- volume injecté (cm3).
Dans les conditions usuelles d’injection...
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BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - COUDERC (F.), CAUSSE (E.), BAYLE (C.) - Drug analysis by capillary electrophoresis and laser induced fluorescence - . Electrophoresis 19, p. 2777-2790 (1998).
-
(2) - CAHOURS (X.), DESSANS (H.), MORIN (P.), DREUX (M.), AGROFOGLIO (L.) - Determination at ppb level of an anti-human immunodeficiency virus nucleoside drug by capillary electrophoresis-electrospray ionization tandem mass spectrometry - . J. Chromatogr. A 895, p. 101-109 (2000).
-
(3) - BREADMORE (M.C.) , HADDAD (P.R.) - Approches to enhancing the sensitivity of capillary electrophoresis methods for the determination of inorganic and small organic anions. - Electrophoresis 22 (12) p. 2464- 2489 (2001).
-
(4) - GAREIL (P.), PELTRE (G.) - Électrophorèse - . Électrophorèse
-
(5) - MONÉGIER (B.) - Électrospray - . Électrospray (1997).
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