Bibliographie & annexes
Présentation
Auteur(s)
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Myriam TAVERNA : Maître de conférences en chimie analytique Laboratoire de chimie analytique Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry)
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Isabelle LE POTIER : Maître de conférences en chimie analytique Laboratoire de chimie analytique Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry)
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Philippe MORIN : Professeur de chimie analytique - Institut de chimie organique et analytique - Université d’Orléans
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Lire l’articleINTRODUCTION
L’électrophorèse capillaire est une technique très performante combinant la plupart des avantages de l’électrophorèse traditionnelle et de la chromatographie liquide haute performance : large champ d’application, efficacité très importante, grande rapidité et souplesse incontestable de mise en œuvre. La plupart des appareils commercialisés bénéficie d’une complète automatisation permettant à la fois l’injection de l’échantillon, la séparation des analytes ainsi que leur détection. C’est une technique compatible avec de nombreux modes de détection, dont les plus courants sont la spectrophotométrie d’absorption UV-visible, la fluorimétrie et la spectrométrie de masse.
Ceci est le deuxième volet de l’étude sur l’électrophorèse capillaire qui comprend :
Électrophorèse capillaire- Principe : Électrophorèse capillaire. Principe ;
[P 3 366] : Électrophorèse capillaire. Appareillage ;
Électrophorèse capillaire- Applications : Électrophorèse capillaire. Applications.
Pour un exposé sur la théorie générale de l’électrophorèse capillaire, le lecteur pourra consulter l’article Électrophorèse, référence , dans ce traité.
L'expertise technique et scientifique de référence
VERSIONS
- Version courante de oct. 2013 par Agnès HAGÈGE, Thi Ngoc Suong HUYNH
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Structure générale4. Détecteurs
Les détecteurs utilisés en électrophorèse capillaire doivent répondre à plusieurs exigences, la plus importante étant la haute sensibilité indispensable pour détecter les faibles quantités d’échantillons analysés en électrophorèse capillaire. Pour minimiser l’élargissement de bandes, les volumes d’échantillon injectés doivent rester inférieurs à 2 % du volume total du capillaire, qui est de l’ordre de 1 à 5 µL pour un capillaire de dimension classique 50 cm × 50 µm. Les détecteurs doivent également être conçus de manière soit à permettre la détection directement à partir du capillaire dont une très faible section va servir de cellule de détection, soit à s’adapter « off-column » en maintenant, grâce à des connexions ou interfaces appropriées, la configuration capillaire nécessaire à l’écoulement des flux. Les modes de détection commercialisés sont les spectrométries UV/visible à longueur d’onde fixe ou variable, à barrettes de diodes, la fluorescence laser, la spectrométrie de masse. Les méthodes de détection indirecte sont également exploitées. De façon moins fréquente ont été mentionnées dans la littérature la détection ampérométrique, conductimétrique et radiométrique.
Si les concentrations minimales détectables en EC sont souvent plus élevées qu’en CPL, les quantités minimales détectables sont plus faibles, permettant ainsi d’analyser des échantillons disponibles uniquement en faible quantité.
4.1 Détection UV/visible
Tous les appareils commercialisés possèdent ce mode de détection. En général, la détection des composés a lieu à travers le capillaire lui-même, près de l’extrémité de sortie. Le capillaire sert ainsi de cellule de détection cylindrique dont le trajet optique est environ égal à 60 % du diamètre du capillaire. La couche de polyimide recouvrant le capillaire, opaque aux rayons UV, est éliminée par combustion sur une longueur de 1 cm, à quelques centimètres de l’extrémité de sortie. Plusieurs catégories de lampes UV peuvent être employées :
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lampes ayant une bande passante étroite et une intensité d’émission...
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Détecteurs
BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - COUDERC (F.), CAUSSE (E.), BAYLE (C.) - Drug analysis by capillary electrophoresis and laser induced fluorescence - . Electrophoresis 19, p. 2777-2790 (1998).
-
(2) - CAHOURS (X.), DESSANS (H.), MORIN (P.), DREUX (M.), AGROFOGLIO (L.) - Determination at ppb level of an anti-human immunodeficiency virus nucleoside drug by capillary electrophoresis-electrospray ionization tandem mass spectrometry - . J. Chromatogr. A 895, p. 101-109 (2000).
-
(3) - BREADMORE (M.C.) , HADDAD (P.R.) - Approches to enhancing the sensitivity of capillary electrophoresis methods for the determination of inorganic and small organic anions. - Electrophoresis 22 (12) p. 2464- 2489 (2001).
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(4) - GAREIL (P.), PELTRE (G.) - Électrophorèse - . Électrophorèse
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(5) - MONÉGIER (B.) - Électrospray - . Électrospray (1997).
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