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Auteur(s)
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Alain LOMBARD : Consultant toxicologue et maîtrise des risques, Allotoxconsulting, Antibes, France
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Lire l’articleINTRODUCTION
La sensibilisation à une substance chimique survient après des contacts répétés, à faibles doses, pendant une période plus ou moins longue. Les réactions de sensibilisation (allergie) se déclenchent d’une manière inattendue lors d’un nouveau contact fortuit avec la substance sensibilisante.
Les tests chez l’animal de laboratoire suivent le même schéma : induction – temps de latence – déclenchement, suivis de la cotation des effets.
Il est par ailleurs important de savoir utiliser les tests de sensibilisation et de pouvoir interpréter les résultats des études afin de reconnaître et d’évaluer les potentialités allergisantes d’une substance chimique pour l’être humain.
Les tests officiels de détection du pouvoir sensibilisant d’une substance doivent ainsi être choisis avec soin et leurs résultats sont importants pour le classement de la substance.
Quels sont les tests disponibles et comment les interpréter ?
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- Version archivée 1 de mai 2014 par Alain LOMBARD
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Essai OCDE n° 442A : sensibilisation cutanée. Essai de stimulation locale des ganglions lymphatiques (DA)4. Essai OCDE n° 429 : le test de sensibilisation cutanée : essai de stimulation locale des ganglions lymphatiques chez la souris, LLNA (local lymph node assay)
Le test LLNA repose sur le principe que les sensibilisants induisent une prolifération de lymphocytes dans les ganglions lymphatiques drainant le site de l’application de la substance d’essai. Cette prolifération est proportionnelle à la dose appliquée et à la puissance de l’allergène. Elle permet d’obtenir facilement une mesure quantitative de la sensibilisation.
4.1 Induction
Jours 1,2 et 3 :appliquer 25 μl d’une dilution adaptée de la substance d’essai, du véhicule seul ou du TP au dos de chaque oreille.
HAUT DE PAGE4.2 Temps de latence
Pendant les jours 4 et 5, aucun traitement n’est appliqué.
HAUT DE PAGE4.3 Évaluation de la sensibilisation – jour 6
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Injecter 250 μl d’une solution tampon phosphate stérile [phosphate-buffered saline] (PBS) contenant 20 μCi (7.4 × 105 Bq) de (3H) – méthylthymidine dans la veine caudale de toutes les souris traitées et témoins (Il est également possible d’injecter 250 μL de PBS stérile contenant 2 μCi (7.4 × 104 Bq) de 125I-iododésoxyuridine et de la fluorodésoxyuridine à 10-5 M dans la veine caudale de toutes les souris).
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Euthanasier les animaux cinq heures plus tard.
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Exciser les ganglions lymphatiques auriculaires de drainage de chaque oreille de souris.
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La prolifération cellulaire dans les ganglions lymphatiques auriculaires de drainage est mesurée à l’aide d’un marquage radioactif in vivo : incorporation de méthyl thymidine tritiée dans l’ADN des lymphocytes du ganglion locorégional.
La prolifération moyenne de chaque groupe d’essai est comparée à la prolifération moyenne du groupe témoin traité avec le véhicule. On calcule le quotient de la prolifération moyenne dans chaque groupe traité sur celle du groupe témoin traité avec le véhicule, pour obtenir l’indice de stimulation (IS) ; si cette valeur est supérieure ou égale à 3, il est justifié de classer la substance d’essai comme substance ayant un pouvoir de sensibilisation cutanée.
Deux variantes au LLNA utilisant un...
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Essai OCDE n° 429 : le test de sensibilisation cutanée : essai de stimulation locale des ganglions lymphatiques chez la souris, LLNA (local lymph node assay)
ANNEXES
A. Lombard et al. - Évaluation technico-économique des produits au stade initial du développement. Partie 2, pp 153-281, ISTE éditions Ltd London (2024).
HAUT DE PAGE
ECHA (European Chemical Agency)
L’Agence européenne des produits chimiques met en œuvre la législation de l’UE sur les produits chimiques afin de protéger la santé humaine et l’environnement. Les travaux contribuent aussi au bon fonctionnement du marché intérieur, à l’innovation et à la compétitivité de l’industrie chimique européenne. Tout est fabriqué à partir des produits chimiques. L’amélioration de la connaissance des produits dangereux et des réglementations en la matière protège les travailleurs, les consommateurs et l’environnement, facilite le recyclage et encourage l’industrie à mettre au point des solutions de remplacement plus sûres.
L’OCDE propose des lignes directrices pour les essais de produits chimiques sont un ensemble de méthodes d’essai les plus pertinentes agréées internationalement et utilisées par les gouvernements, l’industrie et les laboratoires indépendants pour déterminer l’innocuité des produits chimiques et des préparations, y compris les pesticides et les produits chimiques industriels. Elles couvrent les essais sur les propriétés physico-chimiques des substances, leurs effets sur la santé humaine et leurs effets sur l’environnement ainsi que la dégradation et...
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