Radioanalyse - Applications : dosage biologique

1 - Présentation générale

• 1.1 - Intérêt du marquage d’une substance
• 1.2 - Dilution isotopique
  Figure 1 - Principe de la dilution isotopique Figure 2 - Dosage par dilution isotopique avec extraction directe Figure 3 - Courbe d’étalonnage d’un dosage par compétition

2 - Système d’antigène-anticorps

• 2.1 - Propriétés du système antigène-anticorps
  Figure 4 - Représentation de Scatchard pour un seul site Figure 5 - Représentation de Scatchard d’un anticorps polyclonal à deux sites d’affinité différentes
• 2.2 - Détermination de la constante d’affinité par la méthode de Scatchard
  Tableau 1 Tableau 2

3 - Dosages radio-immunologiques

• 3.1 - Dosages par compétition (RIA)
  Figure 6 - Principe d’un dosage par compétition Figure 7 - Séparation de la fraction libre et liée par adsorption de la fraction libre sur des particules de charbon Dextran Figure 8 - Immunoprécipitation du complexe Ac-Ag grâce à un second anticorps Figure 9 - Compétition en phase hétérogène
• 3.2 - Courbe d’étalonnage et traitement mathématique des données
  Figure 10 - Courbe d’étalonnage d’un dosage par compétition, variation de B*/T en fonction de [Ag] aj Figure 11 - Interpolation linéaire d’une courbe étalonnage Figure 12 - Linéarisation de la courbe d’étalonnage en coordonnées logit-log
• 3.3 - Réalisation pratique : application au dosage de la thyroxine libre
  Tableau 3 Tableau 4
• 3.4 - Dosages immunoradiométriques (IRMA)
  Figure 13 - Séparation des fractions libres et liées à l’aide d’un immunoadsorbant (principe de Miles et Hales) Figure 14 - Courbe d’étalonnage et détermination de la concentration d’un échantillon dans le cas d’un dosage IRMA Figure 15 - Principe de la séparation en phase hétérogène ELSA ( Element Linked Solid Assay)
• 3.5 - Évaluation de l’efficacité analytique d’un dosage radio-immunologique
  Figure 16 - Distribution des fréquences Figure 17 - Limite de détection et pente initiale de la courbe de calibration Figure 18 - Profil de précision Figure 19 - Répartition des populations M+ et M– en fonction du seuil de discrimination choisi Figure 20 - Évolution de la sensibilité et de la spécificité en fonction du seuil de discrimination Figure 21 - Courbe ROC Figure 22 - Comparaison de deux techniques de dosage A et B à l’aide des courbes ROC Figure 23 - Densités de probabilité, , des concentrations obtenues au cours d’un dosage. Composantes systématique et aléatoire de l’erreur totale Figure 24 - Mesure de la spécificité, détermination du pourcentage de réaction croisée induit par la désoxycorticostérone ou le cortisol lors d’un dosage RIA de la progestérone Figure 25 - Impact de la substance interférente, (Ag) C sur la loi d’action de masse Figure 26 - Épreuve de dilution : dosage TSH Figure 27 - Épreuve de surcharge : dosage TSH Figure 28 - Diagramme de Levey-Jennings Figure 29 - Diagramme de Youden Figure 30 - Comparaison de l’exactitude et de la précision de deux trousses A et B Figure 31 - Différents mécanismes d’interférence dans la méthode IRMA Figure 32 - Mécanismes d’interférence avec des autoanticorps lors d’un dosage IRMA Figure 33 - Mécanismes d’interférence des autoanticorps lors d’un dosage RIA Figure 34 - Mécanisme de l’effet crochet Tableau 5 Tableau 6 Tableau 7 Tableau 8 Tableau 9 Tableau 10 Tableau 11 Tableau 12 Tableau 13 Tableau 14 Tableau 15

4 - Détection du signal radioactif

• 4.1 - Scintillation solide
  Figure 35 - Impulsions Figure 36 - Cellule photomultiplicatrice Tableau 16 Tableau 17
• 4.2 - Scintillation liquide
  Figure 37 - Variation du nombre d’impulsions électriques en fonction de l’énergie du rayonnement Figure 38 - Courbe de correction de quenching, qui relie l’efficacité de comptage au paramètre de position du spectre