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Radioanalyse - Applications : dosage biologique

Article de référence | Réf : P3362 v1

Radionucléides - Application : biologie moléculaire

Auteur(s) : François BOURREL, Philippe COURRIÈRE

Date de publication : 10 juin 2003

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RÉSUMÉ

L’autoradiographie permet d'étudier l’exacte localisation d’une substance radiomarquée dans un tissu à des niveaux cellulaire et subcellulaire avec la conservation de l’architecture tissulaire. Cet article présente les différentes techniques d'autoradiographie : sur film et micro-autoradiographie. Une deuxième partie est consacrée au traitement des artefacts, qu'ils soient liés aux conditions expérimentales, à la préparation des tissus, ou à l'évaluation quantitative.

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Auteur(s)

François BOURREL : Docteur en pharmacie - Diplômé de l’Institut national des sciences et techniques nucléaires - du Commissariat à l’énergie atomique (INSTN-CEA) - Attaché des Hôpitaux de Toulouse
Philippe COURRIÈRE : Professeur de biophysique, UFR de pharmacie, Toulouse - Biologiste des centres de luttes contre le cancer

INTRODUCTION

L’autoradiographie est une technique de grande qualité pour étudier l’exacte localisation d’une substance radiomarquée dans un tissu à des niveaux cellulaire et subcellulaire avec la conservation de l’architecture tissulaire. De plus, des quantifications absolues ou relatives de la substance marquée peuvent être obtenues. Cependant, l’autoradiographie est aussi quelquefois une technique d’interprétation compliquée et l’association de techniques immunohistochimiques et fluorométrique peuvent palier ces problèmes. Les principales améliorations portées à l’autoradiographie consistent à réduire l’acquisition du signal radioactif par l’utilisation d’imageurs permettant des gains de temps considérables et une analyse de l’image.

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BIBLIOGRAPHIE

(1) - BLANC (D.) - Physique nucléaire pour les médecins et les biologistes - . 213 p., Masson, Paris, 1995.
(2) - FOOS (J.) - Manuel de radioactivité à l'usage des utilisateurs - . 197 p., Ed. Formascience, Orsay, 1993.
(3) - COURRIÈRE (Ph) - Biophysique sensorielle ; Biophysique de la matière ; Physique nucléaire - . Tome II. Masson, Paris, 1990.
(4) - CHERVU (L.R.), MURTY (D.R.) - Radiolabeling of antigens : procedures and assessment of properties (Radiomarquage d'antigènes : procédures et vérification des propriétés) - . Semin. Nucl. Med. 5, 2, p.157-72, 1975.
(5) - WOOD (W.G.), WACHTER (C.), SCRIBA (P.C.) - Experiences using chloramine-T and 1, 3, 4, 6-tetrachloro-3 alpha, 6 alpha-diphenylglycoluril (Iodogen) for radioiodination of materials for radioimmunoassay (Techniques utilisant la chloramine T et l'iodogen pour la radioiodation de molécules destinées au radioimmunodosage) - . J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 10, 19, p.1051-6, 1981.
...

DANS NOS BASES DOCUMENTAIRES

ANNEXES

Livres et revues

ABRAHAM (G.E.) - Handbook of radioimmunoassay - . Marcel Dekker Inc. 270 Madison Ave NY 10016, 1997.

DELACROIX (D.) - GUERRE (J.P.) - LEBLANC (P.) - Radionucléides et radioprotection - . 210 p. Centre d'études de Saclay, Gif-sur-Yvette, 1994.

BARBIER (Y.) - Les immunodosages de la théorie à la pratique - . 253 p. Éditions de l'ACOMEN, Paris, 1989.

SIMONET (G.) - Les radioisotopes en recherche et radioprotection - . 179 p. Masson, Paris, 1994.

Revue de l'ACOMEN - Spécial radioimmunologie : intérêt clinique, méthodologie, économique - . 172 p. 2, Éditions de l'ACOMEN, Paris, 1995.

Revue de l'ACOMEN - Rencontre ACOMEN de radioanalyse de Vars. Mars. 1998 - . 275 p. 3, Éditions de l'ACOMEN, Paris, 1998.

INGRAND (J.) - Numéro centré sur la R.I.A - . J. Med. Nucl. Biophy. 1, 15, p.1-113, 1991.

STUMPF (W.E.) - SOLOMON (H.F.) - Autoradiography and correlative imaging - . 597 p, Academic Press London, 1995.

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Sommaire
Sommaire détaillé

INTRODUCTION

1 - GÉNÉRALITÉS

1.1 - Présentation générale
1.2 - Définition
1.3 - Domaines d'application
1.4 - Méthode

2 - AUTORADIOGRAPHIE SUR FILMS

2.1 - Principe
2.2 - Autoradiographie directe
2.3 - Autoradiographie indirecte
2.4 - Choix du film
2.5 - Facteurs influençant la résolution

3 - MICRO-AUTORADIOGRAPHIE

3.1 - Objectif
3.2 - Principe
3.3 - Composition des émulsions par rapport à la macro-autoradiographie

4 - ARTEFACTS LIÉS AUX CONDITIONS EXPÉRIMENTALES ET À LA PRÉPARATION DES TISSUS

4.1 - Anomalie de distribution du composé radiomarqué
4.2 - Fuite et redistribution du composé radiomarqué et de constituants tissulaires
4.3 - Échec d’identification de la nature chimique du composé radiomarqué
4.4 - Autoabsorption du tissu
4.5 - Dommages tissulaires liés à la congélation

5 - AUTORADIOGRAPHIE QUANTITATIVE

5.1 - Méthode générale
5.2 - Artefacts liés à l’évaluation quantitative

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