Développement de tests immunochromatographiques sur « bandelette » plus sensibles
Tests de détection biologique très sensibles à base de nouveaux traceurs fluorescents

2.1 Principe des tests « bandelette »

Le test bandelette est un système de détection simple (très peu de manipulations à réaliser), rapide (résultat obtenu en moins de 30 min), peu coûteux et qui peut être utilisé par des non-spécialistes sur le terrain. Les bandelettes sont formées en général de trois zones fixées ensemble sur un support plastique : une zone d'absorption, une zone de réaction (formée généralement d'une membrane de nitrocellulose), et une zone de dépôt d'échantillon (généralement en fibres de verre) (figure 1a). Dans certains tests « bandelette » une zone de dépôt du traceur est présente. Les bandelettes peuvent être logées dans des cassettes plastiques comme le montre la figure 1b. Ces cassettes facilitent l'utilisation du test et notamment le dépôt de l'échantillon.

La zone de réaction est formée d'une membrane de nitrocellulose comportant deux lignes ou bandes. La première de ces lignes, dite ligne « test », est réalisée soit par dépôt d'anticorps dirigés contre la molécule d'intérêt, soit par dépôt de la molécule d'intérêt ou d'analogue de cette molécule. C'est le signal obtenu au niveau de cette ligne qui indiquera la présence ou non de la molécule à doser. Dans certains cas, ce signal permettra également la quantification de la molécule d'intérêt. La deuxième ligne, dite ligne « contrôle », est constituée (dans la plupart des cas) par des anticorps dirigés contre la molécule traceur. La fixation de ces protéines sur la membrane se fait par un ensemble d'interactions hydrophobes et électrostatiques et des liaisons hydrogène. Ce format utilise le plus souvent comme traceur des anticorps sur lesquels sont fixées des molécules permettant d'obtenir un signal, en général colorimétrique ou fluorescent, afin de détecter la présence de la molécule d'intérêt. L'échantillon contenant la molécule à détecter et le traceur peuvent être mélangés et incubés avant le dépôt sur la bandelette. Cependant le plus souvent, le traceur est déposé au préalable sur la bandelette juste après la zone de dépôt d'échantillon (voir figure ...