Article

1 - ANALYSE RAPIDE OU À HAUTE RÉSOLUTION EN CHROMATOGRAPHIE

2 - STRATÉGIES ALTERNATIVES À LA RPLC

3 - ANALYSE DE PROTÉINES THÉRAPEUTIQUES PAR RPLC

4 - CONCLUSION

Article de référence | Réf : P1494 v1

Évolutions majeures en chromatographie liquide

Auteur(s) : Davy GUILLARME

Relu et validé le 15 nov. 2023

Pour explorer cet article
Télécharger l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !

Sommaire

Présentation

RÉSUMÉ

La chromatographie en phase liquide HPLC est une technique analytique employée dans de nombreux secteurs d'activité. Des solutions innovantes en termes de phases stationnaires et d'instruments sont apparues afin d'en augmenter la productivité. En parallèle, des stratégies orthogonales permettant de modifier la sélectivité et la rétention se sont développées. Enfin, cette technique s'est aussi adaptée à la caractérisation de protéines thérapeutiques, en plein essor dans le domaine pharmaceutique.

Lire cet article issu d'une ressource documentaire complète, actualisée et validée par des comités scientifiques.

Lire l’article

ABSTRACT

Main evolutions in liquid chromatography

High performance liquid chromatography (HPLC) is an analytical technique suitable for a large variety of applications. Some innovative solutions, in terms of stationary phases and instrumentation, were introduced to improve productivity. In parallel, some alternative strategies allowing severe modifications of selectivity and retention were also developed. Finally, this approach was also adapted for the characterisation of therapeutic proteins, which is currently a hot topic in the pharmaceutical industry

Auteur(s)

  • Davy GUILLARME : Chargé d'enseignement Laboratoire de chimie analytique pharmaceutique, École des Sciences pharmaceutiques, Université de Genève

INTRODUCTION

La chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC) est une technique analytique clé, utilisée dans de nombreux secteurs d'activité, pour l'analyse de matrices agroalimentaires, environnementales et pharmaceutiques. Cette technique séparative peut être utilisée aussi bien pour des analyses purement qualitatives, que pour des applications quantitatives. Durant ces dernières années, les technologies employées en HPLC (phases stationnaires, phases mobiles, instrumentation...) ont évolué de manière très rapide, afin de répondre à certaines exigences des utilisateurs. Trois axes principaux d'amélioration ont été suivis.

Le premier axe de développement de l'HPLC est l'augmentation du débit d'analyse, afin d'obtenir des séparations cinq à dix fois plus rapides qu'auparavant, ainsi que la possibilité d'atteindre des séparations à plus haut pouvoir de séparation (à haute résolution). Pour cela, il est possible d'utiliser des supports chromatographiques innovants tels que les colonnes monolithiques, les colonnes remplies de particules poreuses de moins de 2 μm ou les colonnes remplies de particules superficiellement poreuses de moins de 3 μm. Il est également important de garder en tête qu'une augmentation de la température de la phase mobile permet une amélioration significative des performances chromatographiques. Cependant, afin de tirer tous les bénéfices de la chromatographie rapide et/ou à haute résolution, une instrumentation adaptée est nécessaire et des développements importants ont été réalisés dans ce sens au cours des dix dernières années.

Un autre axe de développement concerne l'utilisation de modes alternatifs de chromatographie. En effet, la chromatographie liquide à polarité des phases inversées (RPLC) est de loin la plus utilisée aujourd'hui mais il peut être intéressant d'avoir recours à des modes de séparations alternatifs pour moduler les sélectivités et rétentions de certains composés problématiques. Deux modes peuvent avoir de l'intérêt, il s'agit de la chromatographie d'interaction hydrophile (HILIC) et de la chromatographie supercritique (SFC). La première de ces deux approches est particulièrement adaptée à l'analyse de composés très hydrophiles (sucres, acides aminés) et/ou ionisables (molécules pharmaceutiques), difficilement analysable en RPLC. La seconde convient à une gamme plus large d'analytes, dont en particulier les composés très lipophiles (lipides, vitamines liposolubles...) difficiles à éluer en RPLC classique.

Enfin, Le dernier axe de développement est plus spécifique du domaine pharmaceutique et concerne l'analyse de protéines et anticorps monoclonaux thérapeutiques ayant des masses molaires comprises entre 5 et 150 kDa. Pour ce type d'analyse, les techniques historiques, telles que la chromatographie d'exclusion stérique (SEC) et la chromatographie d'échange d'ions (IEX) sont désormais fortement concurrencées par les nouveaux supports chromatographiques à large taille de pores disponibles en RPLC et offrant une meilleure compatibilité avec la spectrométrie de masse (MS).

Le but de cet article est d'exposer les évolutions majeures de la chromatographie liquide, afin que les utilisateurs puissent appliquer ces nouvelles méthodologies dans leurs laboratoires respectifs. Pour la théorie et les différents méthodes, se reporter aux articles [P 1 445] et [P 1 455].

Cet article est réservé aux abonnés.
Il vous reste 94% à découvrir.

Pour explorer cet article
Téléchargez l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !


L'expertise technique et scientifique de référence

La plus importante ressource documentaire technique et scientifique en langue française, avec + de 1 200 auteurs et 100 conseillers scientifiques.
+ de 10 000 articles et 1 000 fiches pratiques opérationnelles, + de 800 articles nouveaux ou mis à jours chaque année.
De la conception au prototypage, jusqu'à l'industrialisation, la référence pour sécuriser le développement de vos projets industriels.

MOTS-CLÉS

HPLC UHPLC HILIC SFC

KEYWORDS

HPLC   |   UHPLC   |   HILIC   |   SFC

DOI (Digital Object Identifier)

https://doi.org/10.51257/a-v1-p1494


Cet article fait partie de l’offre

Médicaments et produits pharmaceutiques

(124 articles en ce moment)

Cette offre vous donne accès à :

Une base complète d’articles

Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques

Des services

Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources

Un Parcours Pratique

Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses

Doc & Quiz

Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive

ABONNEZ-VOUS

Cet article est réservé aux abonnés.
Il vous reste 94% à découvrir.

Pour explorer cet article
Téléchargez l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !


L'expertise technique et scientifique de référence

La plus importante ressource documentaire technique et scientifique en langue française, avec + de 1 200 auteurs et 100 conseillers scientifiques.
+ de 10 000 articles et 1 000 fiches pratiques opérationnelles, + de 800 articles nouveaux ou mis à jours chaque année.
De la conception au prototypage, jusqu'à l'industrialisation, la référence pour sécuriser le développement de vos projets industriels.

Cet article fait partie de l’offre

Médicaments et produits pharmaceutiques

(124 articles en ce moment)

Cette offre vous donne accès à :

Une base complète d’articles

Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques

Des services

Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources

Un Parcours Pratique

Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses

Doc & Quiz

Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive

ABONNEZ-VOUS

Sommaire
Sommaire

BIBLIOGRAPHIE

  • (1) - HEINISCH (S.), ROCCA (J.L.) -   Sense and nonsense of high-temperature liquid chromatography.  -  Journal of Chromatography A, 1216, p. 642-658 (2009).

  • (2) - GUILLARME (D.), HEINISCH (S.), ROCCA (J.L.) -   Effect of temperature in reversed phase liquid chromatography.  -  Journal of Chromatography A, 1052, p. 39-51 (2004).

  • (3) - NGUYEN (D.T.T.), GUILLARME (D.), HEINISCH (S.), BARRIOULET (M.P.), ROCCA (J.L.), RUDAZ (S.), VEUTHEY (J.L.) -   High throughput liquid chromatography with sub-2 mm particles at very high pressure and high temperature.  -  Journal of Chromatography A, 1167, p. 76-84 (2007).

  • (4) - GUIOCHON (G.) -   Monolithic columns in high-performance liquid chromatography.  -  Journal of Chromatography A, 1168, p. 101-168 (2007).

  • (5) - CABRERA (K.) -   Applications of silica-based monolithic HPLC columns.  -  Journal of Separation Science, 27, p. 843-852 (2004).

  • (6)...

Cet article est réservé aux abonnés.
Il vous reste 92% à découvrir.

Pour explorer cet article
Téléchargez l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !


L'expertise technique et scientifique de référence

La plus importante ressource documentaire technique et scientifique en langue française, avec + de 1 200 auteurs et 100 conseillers scientifiques.
+ de 10 000 articles et 1 000 fiches pratiques opérationnelles, + de 800 articles nouveaux ou mis à jours chaque année.
De la conception au prototypage, jusqu'à l'industrialisation, la référence pour sécuriser le développement de vos projets industriels.

Cet article fait partie de l’offre

Médicaments et produits pharmaceutiques

(124 articles en ce moment)

Cette offre vous donne accès à :

Une base complète d’articles

Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques

Des services

Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources

Un Parcours Pratique

Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses

Doc & Quiz

Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive

ABONNEZ-VOUS