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Auteur(s)
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Dominique PRADEAU : Pharmacien des hôpitaux - Docteur ès sciences pharmaceutiques
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Chantal DAUPHIN : Maître de conférences UFR Pharmacie-Université Paris-XI - Docteur ès sciences pharmaceutiques
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Lire l’articleINTRODUCTION
Les applications de la chromatographie en couche mince (CCM) – thin layer chromatography TLC – sont multiples comme le montrent le nombre et la diversité des publications internationales sur ce sujet. Une commission de la Société française des Sciences et Techniques pharmaceutiques, coprésidée par J. Rabiant et D. Pradeau, a publié les derniers développements en chromatographie planaire en présentant de nombreux exemples dans des domaines variés comme les substances naturelles, les interactions contenant-contenu, la toxicologie d’urgence à l’hôpital, la recherche des traces d’explosifs après attentat et les produits pharmaceutiques .
Les aspects théoriques de la chromatographie planaire sont traités dans l’article [P 1 475], référence , dans ce même volume.
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1. Étude de substances naturelles
La chromatographie en couche mince (CCM) s’est imposée comme une des techniques de base dans la recherche sur les substances naturelles, en raison de sa simplicité de mise en œuvre et de sa capacité de séparation et d’analyse des mélanges complexes que constituent les extraits bruts d’origine naturelle.
Elle permet de comparer rapidement et simultanément plusieurs dizaines d’échantillons, dans des conditions peu onéreuses, et ce avec une grande flexibilité par rapport aux autres techniques couramment pratiquées dans le domaine des produits naturels (chromatographie liquide haute pression, chromatographie en phase gazeuse et chromatographie de partage centrifuge...).
Actuellement, dans l’environnement de criblage intensif visant à découvrir de nouvelles molécules naturelles présentant des activités biologiques, la CCM est utilisée soit comme outil de criblage primaire systématique (criblage chimique), soit comme méthode de suivi de fractionnement d’extraits bruts initialement sélectionnés pour leur activité dans un test déterminé.
La CCM est également pratiquée, en raison de son pouvoir de résolution, comme technique ultime de séparation de mélanges complexes lorsque les autres techniques ont échoué.
La recherche sur les métabolites secondaires produits par les plantes et les micro-organismes a ainsi grandement bénéficié des multiples possibilités de la CCM.
1.1 La chromatographie en couche mince et les plantes
Dans ce domaine, les applications ont été extrêmement nombreuses et ont exploité, au cours du temps, les combinaisons les plus variées offertes par la CCM, tant pour des études qualitatives que quantitatives.
On peut mentionner, à titre d’exemples non limitatifs, l’utilisation de différents types de couches minces selon les familles chimiques à étudier :
-
couche mince de polyamides, dans le cas de dérivés phénoliques, de tanins, de glucosides, de flavonoïdes ;
-
couche mince de silice, pour les stéroïdes, les dérivés lipidiques (acides gras, dérivés mono, di et triglycérides, sapogénines, sphingolipides) ;
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couche mince d’alumine, support plus rarement utilisé que le gel de silice, mais convenant particulièrement à l’étude des terpènes et de certains alcaloïdes.
La diversité des systèmes éluotropes...
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - PRADEAU (D.), RABIANT (J.) - Nouvelles perspectives en chromatographie planaire. II. Applications - . Rapport d’une commission SFSTP, STP Pharma Pratiques, vol. 9, no 1, p. 81-115 (1999).
-
(2) - WAGNER (H.), BLADT (S) - Plant drug analysis, a thin layer chromatography atlas - . Springer (2e éd.) (1996).
-
(3) - HOSTETTMANN (K.), TERREAUX (C.), MARSTON (A.), POTTERAT (O.) - The role of planar chromatography in the rapid screening and isolation of bioactive compounds from medicinal plants - . J. Planar Chromatography – 10, 4, p. 251-257, (1997).
-
(4) - RAHALISON (L.), HAMBURGER (M.), HOSTETTMANN (K.), MONOD (M.), FRENK (E.) - A bioautographic agar overlay method for the detection of antifungal compounds from higher plants - . Phytochemical Analysis, 2, p. 199-203 (1991).
-
(5) - DRAUTZ (H.), ZÄHNER (H.) - A new method of screening for secondary metabolite in Streptomyces - . K.P. Schaal et G. Pulverer Éds. p. 515-519. Actinomycetes, Zbl. Bakt Suppl. vol. 11, G. Fischer...
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