Bibliographie & annexes
Présentation
RÉSUMÉ
Cet article a pour objectif principal la chromatographie en couche mince dite planaire. Véritable alternative économique, cette méthode fiable trouve ses applications dans des domaines aussi variés que la médecine légale, la pharmaceutique ou encore l’alimentaire. Le processus chromatographique ainsi que sa mise en oeuvre sont tout d’abord exposés : comparaisons, domaines d’application, etc. Par la suite, les grandeurs fontamentales en chromatographie planaire sont présentées pour une meilleure compréhension du phénomène. Pour terminer, une analyse détaillée des combinaisons phase stationnaire/phase mobile (et mécanismes de rétention) conclut cet article.
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This article is mainly dedicated to thin layer (or planar) chromatography. A true economic alternative, this reliable method has applications in domains as varied as legal medicine, pharmaceutics or the food industry. The chromatographic process and its implementation are firstly presented: comparisons, application domains, etc. Fundamental quantities in planar chromatography are then dealt with for a better understanding of the phenomenon. To conclude, a detailed analysis of the stationary/mobile phase combinations (and retention mechanisms) is provided.
Auteur(s)
-
Antoine Michel SIOUFFI : Docteur ès Sciences - Professeur émérite à l’Université Paul Cézanne, Aix Marseille III
-
Chantal DAUPHIN : Docteur ès Sciences Pharmaceutiques - Maître de conférences à l’université Paris XI
-
Dominique PRADEAU : Docteur ès Sciences Pharmaceutiques - Pharmacien responsable de l’Établissement pharmaceutique des Hôpitaux de Paris
INTRODUCTION
Les progrès réalisés dans le domaine des matériaux adsorbants, de l’instrumentation, de la quantification et des possibilités de détection ont conduit à une renaissance de la chromatographie planaire. La chromatographie en couche mince (thin layer chromatography TLC) ne constitue pas uniquement une alternative économique, il s’agit d’une méthode pratique, rapide et fiable qui ne nécessite pas des préparations d’échantillons très complexes.
Elle est utilisée pour le « screening » en toxicologie clinique, en médecine légale, en pharmacognosie.
Elle joue un rôle important dans le contrôle des produits pharmaceutiques (identification, pureté, stabilité, dosage) et des produits alimentaires (recherche d’impuretés toxiques).
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Présentation
Grandeurs fondamentales en chromatographie planaire2. Mise en œuvre d’une chromatographie planaire
Nous distinguerons le cas du mouvement de la phase mobile par capillarité et le mouvement à flux forcé.
2.1 Géométrie de la couche de phase stationnaire
La chromatographie sur papier spécial (matière fibreuse ou adsorbante) qui peut être découpé avec des ciseaux à la dimension voulue n’est plus guère utilisée de nos jours que dans quelques cas particuliers comme la chromatographie des colorants.
En CCM, les plaques prêtes à l’emploi sont disponibles chez de nombreux fabricants. Elles sont constituées d’un support inerte rigide ou souple (plaque de verre, feuille d’aluminium, de polyamide, etc.) sur lequel la phase stationnaire est déposée sous forme d’une couche mince (épaisseur de 200 à 250 µm).
Seules sont disponibles des couches de particules solides agglomérées par un liant organique ou minéral qui sert également à assurer l’adhésion sur le support inerte. Il n’existe pas de plaques commerciales de phase stationnaire liquide déposée sur un support solide. Il appartient à l’utilisateur de les préparer le cas échéant. Avec des plaques prêtes à l’emploi, on ne peut réaliser que des chromatographies liquide/solide. Les dimensions habituelles de la surface de la couche sont :
On appelle nanoplaques ou plaques HPTLC (High Performance Thin Layer Chromatography) des plaques de 10 × 10 cm2 ou de 10 × 5 cm2 dont le diamètre des particules est beaucoup plus restreint (5 à 7 µm) que celui des particules des plaques TLC (11 à 13 µm). Il existe aussi des plaques de silice monolithique où la silice (préparée par un procédé sol/gel) est directement greffée sur le support. Cette technique est déjà expérimentée en chromatographie liquide haute performance depuis 2001. Ces plaques appelées UTLC (Ultra Thin Layer Chromatography), de silice monolithique greffée sur un support en verre ont été mises sur le marché par Merck en 2002. L’épaisseur de la couche est de 10 µm. Le monolithe est caractérisé, comme en CLHP, par deux types de pores, les macropores (1 à 2 µm) et les mesopores (13 nm).
Les supports chromatographiques...
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Mise en œuvre d’une chromatographie planaire
BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - STAHL (E.) - Dünnschicht-Chromatographie. Ein Laboratoriumshandbuch - . Springer-Verlag, Berlin (1962).
-
(2) - RANDERATH (K.) - Chromatographie sur couches minces - . Gauthier-Villars, Paris (1971).
-
(3) - GUIOCHON (G.), GONNORD (M.F.), ZAKARIA (M.), BEAVER (L.), SIOUFFI (A.M.) - Chromatography with a two dimensional column - . Chromatographia, 17, 121-126 (1983).
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(4) - RIGHEZZA (M.), SIOUFFI (A.M.) - Planar chromatography with rectangular packed capillary columns and electrochemical detection - . J. Planar Chromatogr., 1, 293-298 (1988).
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(5) - RUOFF (A.L.), GIDDINGS (J.C.), STEWART (G.H.), SHIN (H.K.) - Diffusion of liquids in unsatured paper - . J. Planar Chromatogr., 3, 438-445 (1960).
-
(6) - GUIOCHON (G.), SIOUFFI (A.M.) - Study of the performances of thin layer chromatography. III. Flow velocity of the mobile phase - ....
(liste non exhaustive)
HAUT DE PAGE
Merck http://www.merck.com
Macherey Nagel http://www.macherey-nagel.com
Whatman http://www.whatman.com
Analtech http://www.analtech.com
HAUT DE PAGE1.2 Appareillages de chromatographie planaire
Camag http://www.camag.ch
Desaga http://www.desaga.de
Radiomatic http://las.perkinelmer.com
Shimadzu http://www.shimadzu.fr
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