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RÉSUMÉ
Cet article a pour objectif principal la chromatographie en couche mince dite planaire. Véritable alternative économique, cette méthode fiable trouve ses applications dans des domaines aussi variés que la médecine légale, la pharmaceutique ou encore l’alimentaire. Le processus chromatographique ainsi que sa mise en oeuvre sont tout d’abord exposés : comparaisons, domaines d’application, etc. Par la suite, les grandeurs fontamentales en chromatographie planaire sont présentées pour une meilleure compréhension du phénomène. Pour terminer, une analyse détaillée des combinaisons phase stationnaire/phase mobile (et mécanismes de rétention) conclut cet article.
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Lire l’articleAuteur(s)
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Antoine Michel SIOUFFI : Docteur ès Sciences - Professeur émérite à l’Université Paul Cézanne, Aix Marseille III
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Chantal DAUPHIN : Docteur ès Sciences Pharmaceutiques - Maître de conférences à l’université Paris XI
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Dominique PRADEAU : Docteur ès Sciences Pharmaceutiques - Pharmacien responsable de l’Établissement pharmaceutique des Hôpitaux de Paris
INTRODUCTION
Les progrès réalisés dans le domaine des matériaux adsorbants, de l’instrumentation, de la quantification et des possibilités de détection ont conduit à une renaissance de la chromatographie planaire. La chromatographie en couche mince ( thin layer chromatography TLC) ne constitue pas uniquement une alternative économique, il s’agit d’une méthode pratique, rapide et fiable qui ne nécessite pas des préparations d’échantillons très complexes.
Elle est utilisée pour le « screening » en toxicologie clinique, en médecine légale, en pharmacognosie.
Elle joue un rôle important dans le contrôle des produits pharmaceutiques (identification, pureté, stabilité, dosage) et des produits alimentaires (recherche d’impuretés toxiques).
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Mise en œuvre d’une chromatographie planaireArticle inclus dans l'offre
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1. Processus chromatographique
1.1 Comparaison de la chromatographie liquide sur colonne et de la chromatographie planaire
La partie la plus importante d’un chromatographe est l’ensemble phase stationnaire/phase mobile. Toute opération chromatographique comporte :
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la mise en mouvement de la phase mobile ;
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l’injection des solutés ;
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le processus chromatographique ;
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la détection des solutés.
En chromatographie liquide sur colonne à haute performance (CLHP), la phase mobile est pompée dans la colonne et l’opérateur est maître du débit ; l’injection est effectuée par une vanne à boucle sans interruption du débit de la pompe et les solutés sont injectés dans un système équilibré. Le processus chromatographique se déroule mais il n’est pas visible par l’opérateur. Les solutés séparés sortent de la colonne, ils sont élués et détectés en continu. L’appareillage peut être totalement automatisé.
Une chromatographie planaire (CP) peut se dérouler de deux façons selon que l’opérateur est maître ou non du débit de phase mobile.
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Dans le cas le plus classique, appelé chromatographie en couche mince (CCM), le dépôt des solutés s’effectue à la surface de la phase stationnaire. On peut donc parler d’une injection latérale, à la différence de l’injection centrale réalisée sur colonne. Le dépôt est préalable au mouvement de la phase mobile qui s’effectue par capillarité, et une partie de la phase stationnaire, un côté de la surface plane, est en contact avec l’atmosphère ; on est donc en présence d’un système à trois phases du fait de la présence de cette phase gazeuse. Le processus chromatographique est visible et peut être interrompu à tout instant par l’opérateur s’il constate une anomalie. La différence la plus importante entre la CLHP et la CP est que, dans ce dernier cas, les solutés ne sont pas élués ; c’est l’opérateur qui arrête le processus. Le chromatogramme est ainsi préservé et la même phase stationnaire peut être utilisée pour une autre chromatographie avec un autre solvant après évaporation du premier. La détection ne se fait pas en continu et la plaque doit être transférée vers un détecteur après...
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BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - STAHL (E.) - Dünnschicht-Chromatographie. Ein Laboratoriumshandbuch - . Springer-Verlag, Berlin (1962).
-
(2) - RANDERATH (K.) - Chromatographie sur couches minces - . Gauthier-Villars, Paris (1971).
-
(3) - GUIOCHON (G.), GONNORD (M.F.), ZAKARIA (M.), BEAVER (L.), SIOUFFI (A.M.) - Chromatography with a two dimensional column - . Chromatographia, 17, 121-126 (1983).
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(4) - RIGHEZZA (M.), SIOUFFI (A.M.) - Planar chromatography with rectangular packed capillary columns and electrochemical detection - . J. Planar Chromatogr., 1, 293-298 (1988).
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(5) - RUOFF (A.L.), GIDDINGS (J.C.), STEWART (G.H.), SHIN (H.K.) - Diffusion of liquids in unsatured paper - . J. Planar Chromatogr., 3, 438-445 (1960).
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(6) - GUIOCHON (G.), SIOUFFI (A.M.) - Study of the performances of thin layer chromatography. III. Flow velocity of the mobile phase - ....
(liste non exhaustive)
HAUT DE PAGEMerck
Macherey Nagel3MWhatmanAnaltech HAUT DE PAGE1.2 Appareillages de chromatographie planaire
Camag
DesagaRadiomaticShimadzu HAUT DE PAGE
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