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Microscopie de fluorescence biomédicaleArticle de référence | Réf : E4327 v1
Auteur(s) : Claire LEFORT
Date de publication : 10 oct. 2020
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microscopie plein champ ; widefield microscopy
Méthode instrumentale d’observation rapide d’échantillons peu épais avec un large champ de vue et une résolution limitée, par l’intermédiaire de binoculaires ou d’une caméra. L’image est visualisée par contraste de phase, contraste interférentiel, polarisation ou marquage en fluorescence.
microscopie confocale ; confocal microscopy
Méthode instrumentale d’observation d’échantillons marqués en fluorescence. La fluorescence linéaire est générée par une longueur d’onde précise provenant d’une lampe ou d’un laser. La sélection de la fluorescence provenant du plan focal grâce à un iris, donne le caractère « confocal » à ce système, améliorant ainsi les performances de résolution.
microscopie multiphotonique ; multiphoton microscopy
Méthode instrumentale d’observation d’échantillons pouvant être marqués ou présentant une rupture dans la symétrie de la structure. La fluorescence non linéaire est générée à partir de fluorophores exogène (marquage) ou endogène (autofluorescence). Ces processus non linéaires sont produits par des sources laser impulsionnels.
laser impulsionnel ; pulsed laser
Laser délivrant des photons de façon discontinue avec une durée d’impulsions, une cadence de répétition, une puissance crête et une puissance moyenne définissant les propriétés de la source.
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(1) - MERTZ (J.) - Introduction to Optical Microscopy. - Roberts & Company Publishers (2009).
(2) - HELL (S.W.) - The 2015 super-resolution microscopy roadmap. - Journal of Physics D: Applied Physics, 48, 443001 (2015).
(3) - DIASPRO (A.) - Confocal and Two-photon microscopy, Foundations, applications and advances. - Wiley-Liss Inc., New York (2002).
(4) - LAKOWICZ (J. R.) - Principles of Fluorescence Spectroscopy. - 3rd edn, Berlin : Springer (2006).
(5) - DENK (W.), STRICKLER (J. H.), WEBB (W. W.) - Two-photon laser scanning fluorescence microscopy. - Science, 248, 73-6 (1990).
(6) - SHEPPARD (C.), KOMPFNER (R.) - Resonant scanning optical microscope. - Applied Optics, 17, 2879-2882 (1978).
On peut retrouver les spectres d’absorption linéaire des fluorophores les plus classiques en suivant l’un des liens ci-dessous :
Thermo Fisher Scientific : http://www.thermofisher.com › home › labeling-chemistry
Bio-Rad : https://www.bio-rad-antibodies.com/spectraviewer.html
On peut retrouver quelques spectres d’absorption biphotonique en suivant le lien : https://www.drbio.cornell.edu/cross_sections.html
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