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RÉSUMÉ
L’autoradiographie permet d'étudier l’exacte localisation d’une substance radiomarquée dans un tissu à des niveaux cellulaire et subcellulaire avec la conservation de l’architecture tissulaire. Cet article présente les différentes techniques d'autoradiographie : sur film et micro-autoradiographie. Une deuxième partie est consacrée au traitement des artefacts, qu'ils soient liés aux conditions expérimentales, à la préparation des tissus, ou à l'évaluation quantitative.
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Lire l’articleAuteur(s)
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François BOURREL : Docteur en pharmacie - Diplômé de l’Institut national des sciences et techniques nucléaires - du Commissariat à l’énergie atomique (INSTN-CEA) - Attaché des Hôpitaux de Toulouse
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Philippe COURRIÈRE : Professeur de biophysique, UFR de pharmacie, Toulouse - Biologiste des centres de luttes contre le cancer
INTRODUCTION
L’autoradiographie est une technique de grande qualité pour étudier l’exacte localisation d’une substance radiomarquée dans un tissu à des niveaux cellulaire et subcellulaire avec la conservation de l’architecture tissulaire. De plus, des quantifications absolues ou relatives de la substance marquée peuvent être obtenues. Cependant, l’autoradiographie est aussi quelquefois une technique d’interprétation compliquée et l’association de techniques immunohistochimiques et fluorométrique peuvent palier ces problèmes. Les principales améliorations portées à l’autoradiographie consistent à réduire l’acquisition du signal radioactif par l’utilisation d’imageurs permettant des gains de temps considérables et une analyse de l’image.
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1. Généralités
1.1 Présentation générale
En autoradiographie, une émulsion photographique remplace le compteur qui est utilisé habituellement pour mesurer la radioactivité. Les techniques de comptages basées sur le principe de l’ionisation ou de l’excitation fournissent des informations rapides sur l’activité de la source exprimée en Bq/mg de tissu sans renseigner sur le lieu où est distribuée la radioactivité dans le tissu. L’autoradiographie peut enregistrer la distribution de la radioactivité dans le tissu avec une grande précision parce que chaque cristal d’halogénure d’argent dans l’émulsion photographique est un détecteur indépendant isolé du reste de l’émulsion avec son enveloppe de gélatine. Cette spécificité ne peut pas être atteinte avec des compteurs, à moins d’isoler les fractions tissulaires avec une très grande précision, ce qui est extrêmement difficile au niveau cellulaire, voire subcellulaire.
HAUT DE PAGE1.2 Définition
L’autoradiographie est une méthode d’enregistrement du lieu d’émission de radiations ionisantes émises par une source radioactive incorporée dans un tissu sur un support sensible tels qu'un film photographique ou une émulsion sensible.
Cette technique permet :
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la localisation précise ainsi que l’étude du métabolique de la substance marquée au niveau cellulaire et subcellulaire ;
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la localisation de sources de très faible activité (exemple : 1 désintégration par jour) ; dans ces conditions, le temps d’exposition peut dépasser 6 mois pour l’étude des mécanismes de réparation de l’ADN ;
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la quantification : la correction de l’autoabsorption des émissions bêta de faible énergie du tritium doit être prise en compte.
1.3 Domaines d'application
-
Localisation de l’interaction ligand-récepteur
Les sites de distribution et de fixation de molécules à des récepteurs peuvent être facilement suivis par...
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BIBLIOGRAPHIE
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(2) - FOOS (J.) - Manuel de radioactivité à l'usage des utilisateurs - . 197 p., Ed. Formascience, Orsay, 1993.
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(3) - COURRIÈRE (Ph) - Biophysique sensorielle ; Biophysique de la matière ; Physique nucléaire - . Tome II. Masson, Paris, 1990.
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(4) - CHERVU (L.R.), MURTY (D.R.) - Radiolabeling of antigens : procedures and assessment of properties (Radiomarquage d'antigènes : procédures et vérification des propriétés) - . Semin. Nucl. Med. 5, 2, p.157-72, 1975.
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(5) - WOOD (W.G.), WACHTER (C.), SCRIBA (P.C.) - Experiences using chloramine-T and 1, 3, 4, 6-tetrachloro-3 alpha, 6 alpha-diphenylglycoluril (Iodogen) for radioiodination of materials for radioimmunoassay (Techniques utilisant la chloramine T et l'iodogen pour la radioiodation de molécules destinées au radioimmunodosage) - . J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 10, 19, p.1051-6, 1981.
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DANS NOS BASES DOCUMENTAIRES
ANNEXES
Livres et revues
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BARBIER (Y.) - Les immunodosages de la théorie à la pratique - . 253 p. Éditions de l'ACOMEN, Paris, 1989.
SIMONET (G.) - Les radioisotopes en recherche et radioprotection - . 179 p. Masson, Paris, 1994.
Revue de l'ACOMEN - Spécial radioimmunologie : intérêt clinique, méthodologie, économique - . 172 p. 2, Éditions de l'ACOMEN, Paris, 1995.
Revue de l'ACOMEN - Rencontre ACOMEN de radioanalyse de Vars. Mars. 1998 - . 275 p. 3, Éditions de l'ACOMEN, Paris, 1998.
INGRAND (J.) - Numéro centré sur la R.I.A - . J. Med. Nucl. Biophy. 1, 15, p.1-113, 1991.
STUMPF (W.E.) - SOLOMON (H.F.) - Autoradiography and correlative imaging - . 597 p, Academic Press London, 1995.
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