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Gérard ROBLIN : Docteur ès sciences - Directeur de recherche au Centre national de la recherche scientifique (CNRS) (ER)
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La microscopie permet d’examiner (σκοπειν) des objets ou leurs détails trop petits (µικροσ) pour être vus à l’œil nu en en fournissant des images agrandies, c’est-à-dire de les voir sous des angles apparents plus grands, de les grossir . Les microscopes mettent à la portée de l’homme l’infiniment petit échappant à sa vision ordinaire.
On divisait récemment ces instruments en deux grandes classes suivant que, pour former des images, ils utilisent des faisceaux de radiations électromagnétiques, auxquelles on associe la notion de photon, qui s’étendent pratiquement dans ce spectre du proche infrarouge aux rayons X, ou des faisceaux de radiations corpusculaires : électrons ou particules plus lourdes tels des protons ou certains ions, auxquels la physique moderne sait associer une onde, bien qu’elle ne soit pas électromagnétique. Il s’y ajoute maintenant, outre certains instruments utilisant les propriétés des ondes acoustiques, de nouvelles familles d’instruments fonctionnant selon des principes physiques étudiés plus récemment faisant intervenir l’existence de nuages d’électrons au voisinage des surfaces conductrices (effet tunnel), celle de champs de forces attractives entre corps proches (force atomique) ou les propriétés des ondes lumineuses dites évanescentes.
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- Version archivée 1 de juil. 1987 par Gérard ROBLIN
- Version archivée 2 de avr. 1993 par Gérard ROBLIN
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2. Les applications de la microscopie
2.1 Microscopie optique
Le microscope optique, compte tenu de ses possibilités en matière de résolution (inférieure au micromètre) et de champ (environ entre 0,2 et 2 millimètres) et de son ancienneté historique, est utilisé dans nombre de disciplines variées.
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C’est probablement dans tout ce qui concerne la biologie que son usage est le plus répandu. Pour l’étude des cellules, des tissus, des microbes tant en recherche que pour aider au diagnostic, les objets, dont les dimensions intéressantes vont de quelques micromètres au demi-millimètre, se présentent sous forme de coupes très minces ou de milieux très aplatis entre deux lames. Ainsi ces préparations, rendues transparentes, nécessitent un éclairage par transmission. Elles sont alors visibles par leurs variations d’absorption naturelle à moins qu’elles ne doivent être provoquées par fixation de colorants spécifiques. La préparation est donc obtenue par le procédé dit de coupe et coloration, la coupe, après enrobage dans un milieu comme la paraffine, étant effectuée à l’aide d’un microtome, sorte de « machine à découper le jambon » susceptible de fabriquer des tranches d’une épaisseur de l’ordre de quelques micromètres, les micromanipulations éventuelles (découpes, incisions, injections…) se faisant avec un micromanipulateur, loupe binoculaire associée à un dispositif porte-outils assurant leur maniement sous objectif. Le traitement par coloration n’a pas seulement pour effet de modifier, ou d’apporter, des variations de transmission, mais, notamment en histologie , les colorants choisis ont des effets spécifiques sur les différentes structures permettant effectivement de les différencier et de déterminer leur nature chimique (histochimie). Il est ainsi possible de suivre les modifications expérimentales ou pathologiques que subissent les tissus ou les cellules. Si, en cytologie , les cellules à étudier sont naturellement en suspension, tels les globules sanguins, ou susceptibles de mobilité, telles les cellules de la rate, on en pratique un frottis ou une empreinte d’organe sur une lame de verre subissant fixation et coloration, afin d’obtenir une couche monocellulaire, ce qui est important en hématologie , mais non sans risque de déformation des cellules. La parasitologie et la microbiologie sont aussi des secteurs riches d’application,...
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - TERRIEN (J.) - De la loupe au microscope électronique. - PUF (1951).
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(2) - VICKERS (A.E.J.) - Modern methods of microscopy. - Recueil de 13 articles issus de la revue Research, Butterworths Scientific Publications (1956).
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(3) - BOURRET (A.), PORTIER (R.) - Voir les atomes. - La Recherche (F), 14, no 144, 650-663 (1983).
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(4) - HAWKES (P.) - Électrons et microscopes. - CNRS Éditions (1995).
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(5) - ATTAL (J.) - L’âge adulte du microscope acoustique. - La Recherche, 12, no 121, 478-481 (1981).
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(6) - ATTAL (J.) - La microscopie acoustique. - La Recherche, 14, no 144, 664-667 (1983).
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