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Chromatographie planaire : applicationsArticle de référence | Réf : P1496 v1
Auteur(s) : Karine FAURE
Date de publication : 10 sept. 2016
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L’installation d’une colonne de CPC s’effectue par la mise en équilibre fluidique entre la phase stationnaire et la phase mobile. Pour ce faire, la colonne, qu’elle soit rotor ou bobine, est préalablement remplie de phase stationnaire et mise en rotation à la vitesse nécessaire pour obtenir le champ centrifuge souhaité. Puis la phase mobile est introduite par le biais de la pompe, et son entrée va expulser une certaine quantité de phase stationnaire, jusqu’à l’obtention d’un équilibre. La colonne ainsi prête, l’échantillon peut être injecté. Son élution au travers de la colonne peut s’effectuer selon plusieurs modes. Au-delà du mode d’élution isocratique, bien connu des utilisateurs de chromatographie sur phase solide (HPLC), des modes spécifiques à la chromatographie de partage centrifuge peuvent également être mis en place.
3.1 Élution, extrusion et gradient
3.1.1 Élution isocratique et gradient
Tout comme pour son alter ego l’HPLC, l’élution isocratique en CPC consiste à éluer avec une phase mobile de nature constante les solutés hors de la colonne remplie d’une phase stationnaire également de nature constante. Il convient donc de choisir phase stationnaire et phase mobile de manière à avoir une sélectivité la plus grande tout en conservant des durées d’analyse courtes. Pour cela, les coefficients de partage K des composés d’intérêt doivent être compris entre 0,2 et 10.
Le choix du système solvant qui va constituer les deux phases en présence est alors crucial. En raison de leurs solubilités mutuelles, il n’est pas possible de sélectionner phase mobile et phase stationnaire de manière indépendante. La colonne chromatographique en CPC est obligatoirement un couple phase haute/phase basse de liquides non miscibles. De très nombreuses combinaisons ont été proposées ...
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TECHNIQUES D'ANALYSE
(1) - MARTIN (A.J.P.), SYNGE (R.L.M.) - A new form of chromatogram employing two liquid phases : a theory of chromatography. 2. Application to the micro-determination of the higher monoamino-acids in proteins. - Biochemical Journal, 35, p. 1358-1368 (1941).
(2) - GREGORY (J.D.), CRAIG (L.C.) - Counter-current distribution of gramicidin. - Journal of Biological Chemistry, 172, p. 839-840 (1948).
(3) - ITO (Y.), WEINSTEIN (M.), AOKI (I.), HARADA (R.), KIMURA (E.), NUNOGAKI (K.) - The coil planet centrifuge. - Nature, 212, p. 985-987 (1966).
(4) - ITO (Y.), BOWMAN (R.L.) - Counter-current chromatography : liquid-liquid partition chromatography without solid support. - Science, 167, p. 281-283 (1970).
(5) - FAURE (K.M.N.), MEUCCI (J.), BERTHOD (A.) - Solvent Selection in counter-current chromatography using small-volume hydrostatic columns. - LCGC North America, 31 (2013).
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Chromatographie de partage centrifuge. Chromatographie liquide sans support solide.
The International Counter-current Chromatography Conference a lieu tous les deux ans (années paires).
HAUT DE PAGE
Instruments CCC hydrodynamiques
US 3775309 - 1973 - Counter-current chromatography with flow-through coil planet centrifuge – R. Bowman, Y. Ito
WO 2006045993 - 2006 - Centrifuge apparatus – Dynamics Extractions Ltd.
Instruments CPC hydrostatiques
US 4968428 - 1989 - Centrifugal counter-current distribution chromatography-Sanki Engineering, Ltd.
FR2791578 - 2000 - Dispositif amélioré de chromatographie de partage centrifuge à cellules – De La Poype François, De La poype Roland, Durand Patrick, Foucault Alain, Legrand Jacq, Patissier Gérard, Rosant Jean Michel
WO 2005011835 - 2005 - Method and device for separating constituents of a liquid charge by means of liquid-liquid centrifuge chromatography François Couillard, Alain Foucault, Daniel Durand, licence Armen Instrment
US 7553421 - 2009 - Method for optimally sizing cells of a centrifugal partition chromatography device – Alain Foucault, Jack Legrand, Luc Marchal, Daniel Durand
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