Présentation

Article

1 - PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE BIDIMENSIONNELLE (2D-LC)

2 - QUAND PRÉFÉRER LA LC×LC À LA LC ?

3 - DÉVELOPPEMENT DE MÉTHODES EN LC×LC

4 - APPLICATIONS EN 2D-LC

5 - CONCLUSION

6 - GLOSSAIRE

Article de référence | Réf : P1457 v1

Quand préférer la LC×LC à la LC ?
Chromatographie en phase liquide bidimensionnelle (2D-LC)

Auteur(s) : Sabine HEINISCH, Morgan SARRUT

Date de publication : 10 août 2020

Pour explorer cet article
Télécharger l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !

Sommaire

Présentation

RÉSUMÉ

La chromatographie liquide bidimensionnelle (2D-LC) est une méthode d’analyse à très haut pouvoir de séparation. Elle combine deux séparations basées sur des mécanismes orthogonaux lui permettant d’accéder à un degré d’information bien supérieur à celui obtenu par chromatographie unidimensionnelle classique (1D-LC). Cet article détaille les différents modes de 2D-LC qui peuvent être envisagés selon la problématique tout en illustrant leur intérêt par rapport à une approche 1D-LC. Les éléments clés du développement de méthode en 2D-LC en ligne sont abordés avant d’illustrer le potentiel de cette technique par des exemples d’applications relatifs à de nombreux secteurs.

Lire cet article issu d'une ressource documentaire complète, actualisée et validée par des comités scientifiques.

Lire l’article

ABSTRACT

Two-dimensional liquid chromatography (2D-LC)

Two-dimensional liquid chromatography (2D-LC) is a high-resolution separative technique. 2D-LC combines two orthogonal separations in order to get a much higher degree of information compared to conventional one-dimensional liquid chromatography (1D-LC). This article describes the different modes used in 2D-LC depending on separation problem. Special attention is paid to the comparison of performance between 1D-LC and 2D-LC. Key aspects of method development are addressed and several applications highlighting the potential of 2D-LC are presented in various fields.

Auteur(s)

  • Sabine HEINISCH : Ingénieur de recherche, Responsable d’équipe de recherche à l’Institut des sciences analytiques Université de Lyon, Institut des sciences analytiques, CNRS, UMR5280, 69100 Villeurbanne, France

  • Morgan SARRUT : Responsable de laboratoire Solvay, Centre de recherche et innovation, 69190 Saint-Fons, France

INTRODUCTION

La chromatographie liquide (LC) est une technique analytique de choix dans de nombreux domaines (se reporter aux articles [P 1 655] [P 1 494] et [P 1 460]). En effet, les différents modes LC (RPLC, IEX, SEC, HIC, HILIC, etc.) permettent d’adapter le pouvoir de séparation aux propriétés physico-chimiques des molécules à analyser. Toutefois, le besoin croissant de caractérisation fine de milieux complexes associé aux exigences réglementaires toujours plus poussées requiert un pouvoir de séparation (ou capacité de pics) que ne peut pas atteindre la LC unidimensionnelle (1D-LC). Cela malgré l’utilisation de systèmes à ultra-haute pression (1 200 à 1 500 bar) associés à des colonnes équipées de diamètre de particules inférieur à 2 μm (UHPLC). La chromatographie en phase liquide bidimensionnelle (2D-LC) permet de répondre à ces enjeux. En effet, la 2D-LC combine deux dimensions de séparations complémentaires, ce qui accroît l’espace de séparation et donc le pouvoir de résolution global. De plus, ajouter une deuxième séparation chromatographique rend plus facilement accessible le couplage à la spectrométrie de masse à des modes de chromatographie incompatibles ou difficilement compatibles (IEX, HIC, NPLC, etc.) permettant l’accès à une dimension d’information supplémentaire. Ce même raisonnement s’applique pour des méthodes existantes, qui peuvent difficilement être modifiées (cas de méthodes pharmaceutiques).

Cet article expose le principe de la 2D-LC, les différentes approches envisageables (ciblées/non ciblées, hors ligne/en ligne) et définit des critères de choix quant à son utilisation par rapport à une méthode 1D-LC. Les paramètres clés pour le développement de méthodes en 2D-LC sont décrits en se focalisant sur le mode 2D-LC « comprehensive » en ligne qui est la technique à plus fort potentiel mais dont le développement de méthodes demeure complexe. Enfin, plusieurs exemples d’applications sont présentés dans de nombreux domaines.

Comme il est d’usage dans la profession, les pourcentages indiqués sont, sauf précision contraire, volumiques.

Cet article est réservé aux abonnés.
Il vous reste 94% à découvrir.

Pour explorer cet article
Téléchargez l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !


L'expertise technique et scientifique de référence

La plus importante ressource documentaire technique et scientifique en langue française, avec + de 1 200 auteurs et 100 conseillers scientifiques.
+ de 10 000 articles et 1 000 fiches pratiques opérationnelles, + de 800 articles nouveaux ou mis à jours chaque année.
De la conception au prototypage, jusqu'à l'industrialisation, la référence pour sécuriser le développement de vos projets industriels.

KEYWORDS

orthogonality   |   LC-LC   |   2D-LC heart-cut   |   2D-LC comprehensive

DOI (Digital Object Identifier)

https://doi.org/10.51257/a-v1-p1457


Cet article fait partie de l’offre

Techniques d'analyse

(290 articles en ce moment)

Cette offre vous donne accès à :

Une base complète d’articles

Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques

Des services

Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources

Un Parcours Pratique

Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses

Doc & Quiz

Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive

ABONNEZ-VOUS

2. Quand préférer la LC×LC à la LC ?

La chromatographie bidimensionnelle est généralement présentée comme une alternative à la chromatographie unidimensionnelle dans le cas d’échantillons complexes. La complexité d’un échantillon prêt à être injecté (c’est-à-dire après une éventuelle préparation) est une notion très vague qui mérite d’être discutée.

Un premier aspect de la complexité est le nombre de constituants de l’échantillon mais il en existe d’autres comme la présence ou non d’isomères (isomères de position, isomères de structure ou énantiomères) difficiles à séparer avec une seule méthode chromatographique, la présence simultanée de composés très fortement et très faiblement concentrés (analyse de traces), une composition d’échantillon variable au cours d’une même étude pour laquelle il est nécessaire de conserver la même méthode analytique (développement d’un médicament).

De façon générale, on peut dire que tout échantillon difficile à analyser avec des méthodes conventionnelles est complexe. Il reste cependant à savoir à quel niveau de complexité la LC×LC peut surpasser la LC. Dans ce paragraphe, il s’agit essentiellement de complexité d’échantillon liée au nombre de composés présents mais des exemples dans le paragraphe 4 mettent en évidence l’apport de la LC×LC pour d’autres aspects de complexité.

2.1 Critères de performance en chromatographie

Les critères de performance en chromatographie sont multiples et malheureusement, bien souvent en opposition les uns par rapport aux autres. Les critères prioritaires sont cependant, un grand pouvoir de séparation, une faible durée d’analyse et une grande sensibilité. Pouvoir quantifier ces critères est indispensable. Pouvoir les relier à des grandeurs...

Cet article est réservé aux abonnés.
Il vous reste 92% à découvrir.

Pour explorer cet article
Téléchargez l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !


L'expertise technique et scientifique de référence

La plus importante ressource documentaire technique et scientifique en langue française, avec + de 1 200 auteurs et 100 conseillers scientifiques.
+ de 10 000 articles et 1 000 fiches pratiques opérationnelles, + de 800 articles nouveaux ou mis à jours chaque année.
De la conception au prototypage, jusqu'à l'industrialisation, la référence pour sécuriser le développement de vos projets industriels.

Cet article fait partie de l’offre

Techniques d'analyse

(290 articles en ce moment)

Cette offre vous donne accès à :

Une base complète d’articles

Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques

Des services

Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources

Un Parcours Pratique

Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses

Doc & Quiz

Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive

ABONNEZ-VOUS

Lecture en cours
Quand préférer la LC×LC à la LC ?
Sommaire
Sommaire

BIBLIOGRAPHIE

  • (1) - GROSKREUTZ (S.R.), SWENSON (M.M.), SECOR (L.B.), STOLL (D.R.) -   Selective comprehensive multidimensional separation for resolution enhancement in high performance liquid chromatography.  -  Part II : Applications, Journal of Chromatography A (2011) https://doi.org/10.1016/j.chroma.2011.06.038

  • (2) - GUIOCHON (G.), MARCHETTI (N.), MRIZIQ (K.), SHALLIKER (R.A.) -   Implementations of two-dimensional liquid chromatography.  -  Journal of Chromatography A, 1189, p. 109-168 (2008) https://doi.org/10.1016/j.chroma.2008.01.086

  • (3) - BEDANI (F.), SCHOENMAKERS (P.J.), JANSSEN (H.-G.) -   Theories to support method development in comprehensive two-dimensional liquid chromatography – A review.  -  Journal of Separation Science, 35, p. 1697-1711 (2012) https://doi.org/10.1002/jssc.201200070

  • (4) - EHKIRCH (A.), GOYON (A.), HERNANDEZ-ALBA (O.), ROUVIERE (F.), D’ATRI (V.), DREYFUS (C.), HAEUW (J.-F.), DIEMER (H.), BECK (A.), HEINISCH (S.), GUILLARME (D.), CIANFERANI (S.) -   A Novel online four-dimensional SECxSEC-IMxMS methodology for characterization of monoclonal antibody size variants.  -  Anal. Chem., 90, p. 13929-13937 (2018) https://doi.org/10.1021/acs.analchem.8b03333

  • ...

1 Événements

Série de congrès bi-annuel « International Symposium on Chromatography » (ISC) qui se déroule en Europe

Série de congrès « HPLC and related techniques » qui se déroule tous les ans alternativement aux États-Unis et en Europe

Série de congrès bi-annuel « Hyphenated techniques in chromatography (HTC) » qui se déroule en Europe

Série de congrès bi-annuel « SEP » qui se déroule à Paris tous les deux ans (congrès francophone)

HAUT DE PAGE

2 Annuaire

HAUT DE PAGE

2.1 Principaux fournisseurs (liste non exhaustive)

Agilent technologies http://www.agilent.com

Waters https://waters.com

Shimadzu https://shimadzu.fr

HAUT DE PAGE

2.2 Associations (liste non exhaustive)

Association francophone des sciences séparatives ASFEP https://www.afsep.com

...

Cet article est réservé aux abonnés.
Il vous reste 94% à découvrir.

Pour explorer cet article
Téléchargez l'extrait gratuit

Vous êtes déjà abonné ?Connectez-vous !


L'expertise technique et scientifique de référence

La plus importante ressource documentaire technique et scientifique en langue française, avec + de 1 200 auteurs et 100 conseillers scientifiques.
+ de 10 000 articles et 1 000 fiches pratiques opérationnelles, + de 800 articles nouveaux ou mis à jours chaque année.
De la conception au prototypage, jusqu'à l'industrialisation, la référence pour sécuriser le développement de vos projets industriels.

Cet article fait partie de l’offre

Techniques d'analyse

(290 articles en ce moment)

Cette offre vous donne accès à :

Une base complète d’articles

Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques

Des services

Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources

Un Parcours Pratique

Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses

Doc & Quiz

Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive

ABONNEZ-VOUS