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Biopuces dynamiques et imagerie en mode de plasmon de surfaceArticle de référence | Réf : P3312 v1
Auteur(s) : Alexia ORTIZ, Caroline TOKARSKI, Christian ROLANDO
Date de publication : 10 sept. 2011
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Développées respectivement dans les milieux des années 1960 et 1970 , les électrophorèses mono- et bidimensionnelles (1DE et 2DE) sont les techniques les plus couramment utilisées pour purifier ou séparer les protéines. L'électrophorèse s'effectue généralement sur gel d'acrylamide, sur lequel les protéines migrent suivant leur masse et/ou leur point isoélectrique.
Le support de séparation appelé matrice est principalement composé d'acrylamide sous forme polymérisée. La polymérisation du gel (figure 1) s'effectue en présence d'acrylamide, de N,N ′-méthylène bis-acrylamide et d'initiateurs de polymérisation : persulfate d'ammonium (APS) et N,N,N ′,N ′-tétraméthylènediamine (TEMED).
Plusieurs facteurs influent sur la qualité de polymérisation (homogénéité, taux de réticulation).
• La vitesse de polymérisation varie avec la concentration d'initiateurs ; cependant, une polymérisation trop rapide (< 10 min) ou trop lente (> 60 min) conduit à une polymérisation non homogène . Le taux de réticulation est contrôlé...
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(1) - KAHN (P.) - * - Science, 20, p. 369-370 (1995).
(2) - WILKINS (M.R.), SANCHEZ (J.C.), GOOLEY (A.A.), APPEL (R.D.), HUMPHERY-SMITH (I.), HOCHSTRASSER (D.F.), WILLIAMS (K.L.) - * - Biotechnology and Genetic Engineering Reviews, 13, p 19-50 (1995).
(3) - HERBERT (B.) - Electrophoresis. - 20, p. 660-663 (1999).
(4) - MOLLOY (M.P.) - * - Analytical Biochemistry, 280, p. 1-10 (2000).
(5) - RABILLOUD (T.) - Electrophoresis. - 19, p. 758-760 (1998).
(6) - RABILLOUD (T.), BLISNICK (T.), HELLER (M.), LUCHE (S.), AEBERSOLD (R.), LUNARDI (J.), BRAUN-BRETON (C.) - Electrophoresis. - 20, p. 3603-3610 (1999).
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