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Auteur(s)
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Reine NEHMÉ : Maître de conférences - Institut de chimie organique et analytique (UMR, CNRS 7311), Institut universitaire de technologie (IUT), département de chimie, université d'Orléans, France
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Lire l’articleINTRODUCTION
Domaine : Techniques d'analyse
Degré de diffusion de la technologie : Émergence | Croissance | Maturité
Technologies impliquées : Électrophorèse capillaire
Domaines d'application : Biologie cellulaire et moléculaire, chimie thérapeutique, cosmétique
Principaux acteurs français :
Pôles de compétitivité : –
Centres de compétence : –
Industriels : –
Autres acteurs dans le monde : un certain nombre de laboratoires académiques ou centres de recherche dont les travaux sont mentionnés en bibliographie. En ce qui concerne les acteurs industriels, on peut citer Caliper Life Sciences (PerkinElmer, Hopkinton – Massachusetts, États-Unis)
Contact : –
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Implication de l'électrophorèse capillaire dans l'étude des réactions enzymatiquesArticle inclus dans l'offre
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2. Enzymes
Les enzymes sont des catalyseurs biologiques, c'est-à-dire des molécules qui accélèrent les transformations chimiques de molécules spécifiques appelées « substrats ». Le(s) composé(s) obtenu(s) suite à la réaction enzymatique est(sont) appelé(s) « produit(s) ». Dans ce document, l'enzyme, le substrat, le produit de la transformation chimique et l'inhibiteur seront respectivement désignés par les lettres E, S, P et I. Une réaction enzymatique peut être représentée de la façon suivante :
où k 1 et k –1 sont les constantes de formation et de dissociation du complexe E–S, respectivement et k 2 est la constante de formation du produit ou la constante de vitesse de la réaction.
Le site actif de l'enzyme est l'endroit où se fixe le substrat (le cas échéant le coenzyme) et où a lieu la réaction enzymatique. Il est souvent localisé au fond d'une poche hydrophobe de l'enzyme et comprend le(s) groupe(s) de liaison et le(s) groupe(s) catalytique(s). Le groupe de liaison est formé par les acides aminés qui interagissent via des liaisons non covalentes avec le substrat tandis que le groupe catalytique est formé d'acides aminés qui assurent la catalyse enzymatique, c"est-à-dire la rupture ou la formation des liaisons au niveau du substrat.
2.1 Cinétique enzymatique
La cinétique enzymatique est l'étude de la vitesse d'une réaction catalysée par une enzyme en fonction de la concentration du substrat et de l'inhibiteur. Cette étude permet de déterminer l'affinité des substrats et des inhibiteurs vis-à-vis de l'enzyme, de connaître le mode d'action de l'enzyme et le type d'inhibition d'un composé donné. Il est également possible de doser l'enzyme pour une concentration donnée de substrat, à...
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - NEHME (H.), NEHME (R.), LAFITE (P.) et al - In-capillary reactant mixing for monitoring glycerol kinase kinetics by CE. - J. Sep. Sci., 36(13), p. 2151-2157 (2013).
-
(2) - NØRBY (J.G.), ESMANN (M.) - The effect of ionic strength and specific anions on substrate binding and hydrolytic activities of Na, K-ATPase. - J. Gen. Physiol., 109(5), p. 555-570 (1997).
-
(3) - KANIE (Y.), KANIE (O.) - Electrophoretically mediated reaction of glycosidases at a nanoliter scale. - Electrophoresis, 24, p. 1111-1118 (2003).
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(4) - TENU (J.-P.), VIRATELLE (O.M.), GARNIER (J.) et al - pH dependence of the activity of β-galactosidase from escherichia coli. - Eur. J. Biochem., 20(3), p. 363-370 (1971).
-
(5) - PALMIERI (S.), LEONI (O.), IORI (R.) - A steady-state kineties study of myrosinase with direct ultraviolet spectrophotometric assay. - Anal. Biochem., 123(2), p. 320-324 (1982).
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DANS NOS BASES DOCUMENTAIRES
1.1 Constructeurs – Fournisseurs – Distributeurs (Liste non exhaustive)
Agilent Technologies (appareillage conventionnel) http://www.chem.agilent.com
Beckman Coulter (appareillage conventionnel) http://www.beckmancoulter.com
Caliper Life Sciences (PerkinElmer) http://www.caliperLS.com
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