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Électrophorèse capillaire - ApplicationsArticle de référence RECHERCHE ET INNOVATION | Réf : IN178 v1
Auteur(s) : Reine NEHMÉ
Date de publication : 10 nov. 2014
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L'électrophorèse capillaire est une technique de choix pour étudier la cinétique (activité, inhibition) de plusieurs types de réactions enzymatiques intéressantes dans les domaines cosmétique, agroalimentaire et thérapeutique. Plusieurs approches peuvent être envisagées, ce qui prouve la flexibilité des tests enzymatiques basés sur l'EC. À ce titre, il faut prendre en compte le nombre de réactifs mis en jeu, leur disponibilité, leur prix et leur taille pour pouvoir choisir le type d'essai approprié. Les méthodes développées sont économes en réactifs, rapides et s'appliquent parfaitement à des échantillons complexes (contenu cellulaire, extraits de plantes, etc.). Des études quantitatives fiables peuvent être réalisées afin de déterminer les constantes cinétiques (Vmax , Km et IC50) d'une réaction enzymatique. L'EC est particulièrement intéressante pour le criblage à haut débit d'effecteurs de l'activité enzymatique surtout si des appareils munis de cassettes multicapillaires sont utilisés. En outre, la réalisation de ces essais sur des micropuces est envisageable pour une miniaturisation plus poussée.
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TECHNIQUES D'ANALYSE
(1) - NEHME (H.), NEHME (R.), LAFITE (P.) et al - In-capillary reactant mixing for monitoring glycerol kinase kinetics by CE. - J. Sep. Sci., 36(13), p. 2151-2157 (2013).
(2) - NØRBY (J.G.), ESMANN (M.) - The effect of ionic strength and specific anions on substrate binding and hydrolytic activities of Na, K-ATPase. - J. Gen. Physiol., 109(5), p. 555-570 (1997).
(3) - KANIE (Y.), KANIE (O.) - Electrophoretically mediated reaction of glycosidases at a nanoliter scale. - Electrophoresis, 24, p. 1111-1118 (2003).
(4) - TENU (J.-P.), VIRATELLE (O.M.), GARNIER (J.) et al - pH dependence of the activity of β-galactosidase from escherichia coli. - Eur. J. Biochem., 20(3), p. 363-370 (1971).
(5) - PALMIERI (S.), LEONI (O.), IORI (R.) - A steady-state kineties study of myrosinase with direct ultraviolet spectrophotometric assay. - Anal. Biochem., 123(2), p. 320-324 (1982).
(6)...
Électrophorèse capillaire – Appareillage.
1.1 Constructeurs – Fournisseurs – Distributeurs (Liste non exhaustive)
Agilent Technologies (appareillage conventionnel) http://www.chem.agilent.com
Beckman Coulter (appareillage conventionnel) http://www.beckmancoulter.com
Caliper Life Sciences (PerkinElmer) http://www.caliperLS.com
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