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Électrophorèse capillaire - ApplicationsArticle de référence RECHERCHE ET INNOVATION | Réf : IN178 v1
Auteur(s) : Reine NEHMÉ
Date de publication : 10 nov. 2014
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L'EC a été utilisée la première fois en 1991 par Banke et coll. pour le suivi de l'activité de la protéase alcaline. Depuis lors, l'EC s'est développée pour la détermination de la cinétique enzymatique et l'identification de substrats, d'activateurs et d'inhibiteurs de nombreuses enzymes. Les différentes approches trouvées dans la littérature pour l'étude des réactions enzymatiques en EC sont indiquées dans la figure 1. On peut distinguer deux stratégies selon que l'incubation est faite à l'extérieur ou à l'intérieur du capillaire (off- capillary ou in-capillary enzymatic assays ).
3.1 Essais enzymatiques à l'extérieur du capillaire (off-capillary enzymatic assays )
Dans cette approche, la réaction enzymatique a lieu dans un flacon à l'extérieur du capillaire. Ce groupe comprend les modes précapillaire et postcapillaire.
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(1) - NEHME (H.), NEHME (R.), LAFITE (P.) et al - In-capillary reactant mixing for monitoring glycerol kinase kinetics by CE. - J. Sep. Sci., 36(13), p. 2151-2157 (2013).
(2) - NØRBY (J.G.), ESMANN (M.) - The effect of ionic strength and specific anions on substrate binding and hydrolytic activities of Na, K-ATPase. - J. Gen. Physiol., 109(5), p. 555-570 (1997).
(3) - KANIE (Y.), KANIE (O.) - Electrophoretically mediated reaction of glycosidases at a nanoliter scale. - Electrophoresis, 24, p. 1111-1118 (2003).
(4) - TENU (J.-P.), VIRATELLE (O.M.), GARNIER (J.) et al - pH dependence of the activity of β-galactosidase from escherichia coli. - Eur. J. Biochem., 20(3), p. 363-370 (1971).
(5) - PALMIERI (S.), LEONI (O.), IORI (R.) - A steady-state kineties study of myrosinase with direct ultraviolet spectrophotometric assay. - Anal. Biochem., 123(2), p. 320-324 (1982).
(6)...
Électrophorèse capillaire – Appareillage.
1.1 Constructeurs – Fournisseurs – Distributeurs (Liste non exhaustive)
Agilent Technologies (appareillage conventionnel) http://www.chem.agilent.com
Beckman Coulter (appareillage conventionnel) http://www.beckmancoulter.com
Caliper Life Sciences (PerkinElmer) http://www.caliperLS.com
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3 - IMPLICATION DE L'ÉLECTROPHORÈSE CAPILLAIRE DANS L'ÉTUDE DES RÉACTIONS ENZYMATIQUES
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